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纳米抗体发现服务
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  • 2023-03-02 10:23:39

四川阿帕克生物科技有限公司

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193年比利时科学家Hames在自然杂志中首次报道在骆验科外周血液中存在一种天然缺失轻链的抗体,这种特殊结构的抗体称为重链抗体 heawchain antibodies.HCAbs。克隆重链抗体的可变区可以得到只有重链可变区组成的单域抗体,称为VHH(Variable domain of heawy chain of heamchain antibody)。VHH晶体宽为2.5nm,长nm,分子量只有15KD,因此被称作纳米抗体(Nanobodies,Nbs),它是目前已知的可结合目标抗原的最小单位,纳米抗体抗体虽然结构简单,但仍然可以达到与传统抗体相当甚至更高的与特异抗原结合的亲和力。相比于传统抗体,单域抗体具有分子量小、稳定性强、易于重组表达等优点。目前纳米抗体被用于癌症免疫治疗,诊断,晶体结构解析,超高分辨率分子成像等领域
阿帕克提供基于噬菌体展示文库,酵母展示文库的纳米抗体发现服务

纳米抗体天然文库筛选服务阿帕克构建了来源于Alpacallama与骆驼的千亿级纳米抗体天然文库,插入率100%,可提供快速筛选服务,最快2-4周完成纳米抗体筛选,亲和可达nM级别。

纳米抗体免疫文库筛选服务a.噬菌体展示文库筛选流程噬菌体展示技术是一种被广泛使用的抗体发现技术,在抗体发现过程中,噬菌体抗体库的筛选是最为关键的环节之一,将文库内的噬菌体与靶标孵育,清除未结合的噬菌体,扩增结合的噬菌体,得到具有亲和力和特异性的克隆组成的亚库,再从中筛选单个克隆。

b.酵母展示文库筛选流程
辞母表面展示技术是一套广泛应用于抗体发现、靶点发现及蛋白工程领域的通用技术。利用酵母的-凝集素系统中的2个核心业单位AaAga2将抗体文库蛋白表达于酵母细胞表面,利用磁珠和流式细胞分选技术进行筛选,获得高亲和力或高稳定性的抗体序列。此项技术在各种骨架形式的抗体工程,如单链可变区scFV、抗体结合区片段Fab、全长1oG、骆驼科单域抗体可变区VHH,以及抗体亲和力成熟、抗体稳定性提升、DH稳定性等方面均有广泛应用。阿帕克建立了成熟稳定的yeast surface display平台,能够方便且快速的发现纳米抗体。

针对筛选获取的先导分子,阿帕克会根据客户需求进一步做抗体功能检测,包括抗原ELISA、细胞FACS、抗原SPR及抗原binning检测。抗原ELISA和抗原SPR主要检测抗原抗体的结合活性与亲和力,细胞FACS检测抗体与细胞的结合活性,抗原binninc检测鉴定筛选的先导抗体分子和阳性抗体识别的抗原表位是否一致 。此外,我司还提供亲和力成熟服务和抗体人源化改造,保证亲和力和亲本在一个数量级。

 

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