

PH1294 | 钙盐染色液(Von Kossa银法)
- PH1294
- 飞净 PHYGENE
- 福建省福州市
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- 2023-12-29 17:13:07
福州飞净生物科技有限公司
产品名称 : | PH1294 | 钙盐染色液(Von Kossa银法) |
产品品牌 : | 飞净 PHYGENE |
货号:PH1294
规格:3×50mL| 3×100mL
保存:常温运输与保存,有效期至12 个月。
产品说明:
钙在人体内大量存在,构成骨骼作为支持人体的支架,在分泌、运送、肌肉收缩、神经传导等也起重要作用。钙在机体内以两种形式存在,一种是离子钙,存在血液循环内,即所谓血钙;另一种是结合钙,和蛋白、碳酸或磷酸结合而沉着在组织内。除骨骼和牙齿外,正常时钙渗透在所有组织和细胞中,一般不以固体状态出现在组织内。但在某些情况下,钙析出成固体并沉着于组织内,则为病理性钙盐沉着。沉着的钙盐主要是磷酸钙,其次为碳酸钙。钙盐通常是单折射的,但草酸钙是双折射的。当使用 HE 染色时,钙一般呈紫蓝色。许多染料可以于钙形成螯合物,包括茜素红 S、红紫素、核固红等。茜素红 S 属一种蒽醌类衍生物,是茜素磺酸钠盐,它能与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物。
钙盐染色常用方法有硝酸银法和茜素红 S 法, 钙盐染色液采用 Von Kossa 硝酸银法,其原理在于该法是一种金属置换法,硝酸银溶液作用于含有不溶性钙盐的切片时,钙被银所置换,银盐在光的作用下被还原为黑色金属银,适用于大量样本的钙盐组织染色。
产品组成
试剂组分 | 3×50mL | 3×100mL |
Von Kossa银溶液 Aqueous Silver Nitrate | 50mL | 100mL |
海波溶液 Sodium Thiosulfate | 100mL | 100mL |
核固红溶液 Nuclear Fast Red Solution | 50mL | 100mL |
操作步骤(仅供参考):
1、组织固定于 10%中性福尔马林,常规脱水包埋。
2、切片厚度 5μm 常规脱蜡至水。
3、蒸馏漂洗几次。
4、切片入 Von Kossa 银溶液中(建议透明材质玻璃瓶),强光照射20min(或在60-100瓦的灯泡前放置1小时或更长时间)孵育切片。 注意:如果染色比较浅或在洗涤步骤中被冲洗掉,则表明紫外线强度不足,建议延长染色时间至几个小时不等。
5、蒸馏漂洗几次。
6、加入海波溶液处理 2-5min。
7、蒸馏水漂洗。
8、用核固红复染5分钟。
9、蒸馏水漂洗。
10、通过分级的酒精脱水,并在二甲苯中澄清。
11、中性树胶封固。
实验结果:
钙盐 黑褐色至深黑色
细胞核 红色
细胞质 红色/粉色
注意事项:
1、紫外线通常会产生更强的反应,因此钙盐通常会染成黑色。 普通的60-100瓦的灯泡通常反应较弱,因此钙盐经常染成棕黑色。
2、通常认为草酸盐会产生阴性的von Kossa染色。
3、如有必要,可做阴性对照。这是通过在步骤4之前在10%的甲酸中处理测试载玻片10分钟来完成的。测试载玻片应显示阴性反应。
4、钙盐组织固定以中性福尔马林为佳,不宜采用 Bouin 液等酸性固定液和甲醛钙固定液。如用常规的 10%福尔马林固定,固定 4~6h 后
即可进行脱水包埋,以防止固定液酸化导致钙盐溶解。