细胞培养过程中出现支原体污染，该怎么办？

在细胞培养过程中，很多小伙伴儿一直受到支原体污染的困扰，我自己养的细胞曾经也遇到过支原体污染，深受其害呀！针对于支原体污染来说，大家一定注意预防！如果已经发现了一丝丝污染迹象，就要做到早发现、早挽救！如果细胞能够救回来，还是可以继续实验的，不耽误实验进度。不过，确实也很难彻底清除啊！如果说实在救不回来，那就再买一株新的细胞吧！最后，要买细胞的同学和老师，可以电话或邮箱联系我们哦！

支原体污染对细胞培养造成多方面的不良影响，已经成为在细胞培养时的一个严重问题，严重干扰实验结果的可信度。因此，定期进行支原体检测和去除，确保无支原体存在细胞培养体系内才能获得准确有效的实验数据。

什么是支原体（Mycoplasma）

支原体是1898年Nocard等发现的一种类似细菌但不具有细胞壁的原核微生物，能在无生命的人工培养基上生长繁殖，直径50-300nm，能通过细菌滤器。过去曾称之为类胸膜肺炎微生物（pleuropneumonia-like organism，PPLO）。1967年正式命名为支原体。

支原体又称霉形体，支原体细胞中可见的细胞器只有核糖体（支原体是原核细胞，原核细胞的细胞器只有核糖体）。支原体是目前发现的smallest、simplest的原核生物，可以轻松地通过滤膜，混入培养系统中，呈高度多形性，多数呈球形，也有杆形、丝状、分支状等多种形态。通常依附在细胞膜表面，支原体没有刚性的细胞壁，因此普通的抗生素对它根本不起作用，实验室常见的种类有：口腔支原体、精氨酸支原体、猪鼻支原体、发酵支原体、人型支原体、唾液支原体、肺支原体和梨支原体等。

支原体污染的后果

细菌和真菌造成的污染相对比较容易检测、预防和去除，然而支原体造成的污染很难察觉，即使生长密度高达 10^7-10^9 CFU/mL，也很难有污染迹象（浑浊、pH变化等）。支原体污染后会导致细胞生长变慢，状态变差，不会马上使细胞致死，但会影响细胞内的各种参数，如改变细胞膜抗原性，改变细胞新陈代谢，干扰核酸的合成，改变 DNA 转染效率，导致染色体畸变等。 

支原体污染来源

1. 工作环境的污染

2. 培养基或其他试剂的污染

3. 污染支原体的细胞造成的交叉污染

4. 实验器材带来的污染

5. 操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)

6. 用来制备细胞的原始组织或器官的污染。

细胞遇到支原体污染，该怎么办？

1. 疑似支原体污染，可通过检测来确认是否污染；

2. 经检测没有发现支原体污染，可采用支原体预防试剂，在平时实验中做好环境和实验用具的消毒工作；

3. 经检测确为支原体污染，使用支原体去除试剂进行挽救；如果救不回来的，只能重新复苏一管或者引进新的细胞；如果能够挽救回来，后续实验中要定期采用支原体预防试剂，避免支原体的污染。