SDS裂解液说明书
产品名称:SDS裂解液
产品货号:BF0041
产品包装规格:SDS裂解液(100ml)
产品用途:SDS裂解液是一种强烈的细胞组织裂解液。SDS裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的western、IP、PAGE、co-IP和ELISA等。
使用说明:
取适量裂解液,使用前加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM,或者根据实验需要加入适当蛋白酶抑制剂。
1.贴壁细胞:去除培养基,PBS,生理盐水或无血清培养基洗1遍,按照6孔板每孔加入200微升左右,枪吹打数次,使裂解液与细胞充分接触,通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会裂解,如果用于ChIP,初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。
2.悬浮细胞:离心收集细胞,按照6孔板每孔加入200微升左右,手指轻弹以充分裂解,如果细胞量较多,必须分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果用于ChIP,初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。
3.细菌或酵母:对于1ml菌液或酵母液,离心去除上清,也可用PBS洗涤一遍后充分去除
上清液,轻轻摇晃离心管使细胞或酵母尽量散,加入200微升裂解液,轻轻振荡或弹击管底使其混匀,冰上裂解10分钟左右,如需要获得更好裂解效果,细菌和酵母可以分别用溶菌酶和破壁每消化,然后使用本品进行裂解。
1.组织样本:将组织剪碎成细小的碎片,然后按每20毫克组织加入200-250微升裂解液的比例加入裂解液,组织液氮冷冻后使用玻璃匀浆器或研磨仪进行研磨后加入裂解液充分裂解。如果用于ChIP,初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。
注意事项:
1.为避免产品反复冻融,可根据用量分装使用。
2.裂解时需低温进行,于4摄氏度或者冰上处理。
3.需自备PMSF,PMSF稳定性非常弱,半衰期只有0.5h,所以必须现配现用。
4.实验时穿好实验服,戴好一次性手套。
保存条件:2-8℃保存,1年有效。
温馨提示:使用前请详细阅读使用说明书,在有效期内使用,并做好个人防护。使用后请妥善处置废弃物。
生产企业名称:武汉博尔夫生物科技有限公司
地址:湖北省鄂州市葛店镇东湖高新智慧城25栋301室