Zenix SEC色谱柱
- Zenix SEC-80
- 苏州赛分
- 江苏省苏州市
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- 2022-12-17 11:54:21
苏州赛分科技股份有限公司
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3 μm粒径
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100、150、300 Å的孔径选择
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极高的分离效率和分辨率
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高容量
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在低和高盐浓度下有高稳定性
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批间重复性
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高的蛋白回收率而不破坏生物活性
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可忽略的非特异性反应
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蛋白、核酸、寡核苷酸、多肽和病毒类生物分子能实现理想的分析和分离
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自然多聚体（如：多糖）、合成多聚体和纳米材料（如：纳米颗粒）能够实现理想的分析和分离
Zenix体积排阻色谱柱采用单分散、球形、表面键合了一层纳米厚度中性亲水性薄膜的3 µm硅胶作为填料。3μm的粒径结合大的孔体积使其成为目前国际上分辨率最高的体积排阻柱。赛分科技独有的表面键合技术保证了填料表面键合的最大化，使其具有高的化学稳定性及最小的非特异性吸附。Zenix系列体积排阻柱有100、150及300Å三种孔径选择，广泛的应用于生物分子及水溶性聚合物的分离与分析。
Zenix SEC色谱柱技术参数表
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固定相
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Zenix SEC-80
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Zenix SEC-100
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Zenix SEC-150
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Zenix SEC-300
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|---|---|---|---|---|
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材料
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表面键合亲水薄膜的硅胶
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表面键合亲水薄膜的硅胶
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表面键合亲水薄膜的硅胶
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表面键合亲水薄膜的硅胶
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颗粒大小
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3 µm
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3 µm
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3 µm
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3 µm
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孔径 (Å)
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~ 80
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~ 100
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~ 150
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~ 300
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蛋白分子量范围
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100 – 50,000
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100 - 100,000
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500 - 150,000
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5,000 – 1,250,000
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水溶性聚合物分子量范围
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500 – 5,000
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500-10,000
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500-25,000
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1,000-100,000
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pH 稳定性
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2 –8.5，短时间可耐pH 8.5-9.5
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2 – 8.5，短时可耐pH 8.5-9.5
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2 – 8.5，短时可耐pH 8.5-9.5
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2 – 8.5，短时可耐pH 8.5-9.5
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反压 (for a 7.8x300 mm)
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~ 1,500 psi
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~ 1,500 psi
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~ 1,500 psi
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~ 1,500 psi
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最大耐受压力 (psi)
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~ 4,500
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~ 4,500
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~ 4,500
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~ 3,500
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盐浓度范围
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20 mM - 2.0 M
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20 mM - 2.0 M
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20 mM - 2.0 M
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20 mM - 2.0 M
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最高使用温度 (oC)
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~ 80
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~ 80
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~ 80
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~ 80
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流动相的兼容性
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常规水相及有机相溶剂
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常规水相及有机相溶剂
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常规水相及有机相溶剂
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常规水相及有机相溶剂
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最高的分辨率
开发小粒径填料的优势在于能实现更高的分离效率和分辨率。当粒径从5 μm降至3 μm时，柱效几乎为原先的两倍。如图1和表1所示：当填料粒径从5 μm降至3 μm时，BSA二聚体、BSA、核糖核酸酶A的塔板数分别从2720、6590、11160提高到4600、13090、22000。图2和表2进一步表明3 μm Zenix柱在分离各种蛋白时能实现更高的分离效率。P-氨基苯甲酸使用30 cm长的Zenix柱时能够达到40,000的塔板数。
图1. Zenix SEC-300和SRT SEC-300分离蛋白混合物A
色谱柱: Zenix SEC-300和SRT SEC-300
流动相: 150mM Sodium phosphate buffer, pH 7.0
流速: 7.8x300 mm为1.0 mL/min; 4.6x300 mm为0.35 mL/min
温度: 室温(~23℃)
检测器: UV 214 nm
进样量: 10 μL (4.6x300 mm为3 μL)
样品: 1) 甲状腺球蛋白(1.0 mg/mL), 670 kD; 2) BSA二聚体, 132 kD; 3) BSA (1.0 mg/mL), 66 kD; 4) 核糖核酸酶A (1.0 mg/mL), 13.7 kD; 5) 尿嘧啶(2.5 μg/mL), 120 D
表1. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分离效率
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峰
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蛋白
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Zenix 300 (4.6x300)
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Zenix 300(7.8x300)
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SRT 300(7.8x300)
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|---|---|---|---|---|
|
1
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甲状腺球蛋白
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2180
|
1730
|
1120
|
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2
|
BSA二聚体
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4390
|
4600
|
2720
|
|
3
|
BSA
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10280
|
13090
|
6590
|
|
4
|
核糖核酸酶A
|
16490
|
22000
|
11160
|
|
5
|
尿嘧啶
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33640
|
38500
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27860
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图2. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分离效率 (内径为7.8 mm)
色谱柱: Zenix SEC (7.8x300 mm, 3 µm)
流动相: 150 mM PBS, pH 7.0
流速: 1.0 mL/min
反压: Zenix SEC-300为1,375 psi, Zenix SEC-150为1,100psi
温度: 室温(~ 23℃)
检测波长: 214 nm
进样量: 10 μL
样品: 1)甲状腺球蛋白 (1.0 mg/L), 670 kD; 2)BSA二聚体, 132 kD; 3) BSA (1.0 mg/L), 66 kD; 4)核糖核A (1.0 mg/L), 13.7 kD; 5) 尿嘧啶 (2.5 μg/mL), 120 D
表2. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分离效率
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峰
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蛋白
|
Zenix 150
|
Zenix 300
|
|---|---|---|---|
|
1
|
甲状腺球蛋白
|
18050
|
2460
|
|
2
|
BSA二聚体
|
2420
|
5110
|
|
3
|
BSA
|
5620
|
13090
|
|
4
|
核糖核酸酶A
|
17600
|
22000
|
|
5
|
尿嘧啶
|
42000
|
38500
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高载样量
载样量是衡量体积排阻色谱柱性能的重要指标之一，下图表明Zenix系列分析色谱柱在BSA上样量高达500 µg的情况下，仍保持着完美的分析峰形。
流动相: 150 mM Sodium phosphate buffer, pH 7.0
流速: 1.0 mL/min
进样量: 10 µL
检测器: UV 214 nm
图4. Zenix SEC-300 色谱柱对BSA载样量的测试图谱
色谱柱: Zenix SEC-300 (3 µm, 7.8x300 mm)
流动相: 150 mM Sodium phosphate buffer, pH 7.0
流速: 1.0 mL/min
进样量: 10 µL
检测器: UV 214 nm
高稳定性
赛分科技独有的表面修饰技术使得硅胶表面的键合密度达到最大化，从而阻止了能够促进键合相脱落的溶剂分子向薄膜内侧的扩散，保证了其在pH 2-8.5范围的稳定使用。Zenix体积排阻柱适用于大多数水性及有机溶剂，包括：醋酸、磷酸、Tris缓冲盐体系、甲醇、乙醇、THF、DMF、DMSO等，同时可耐受高盐溶液，如2.0 M的NaCl。
流动相的兼容性
Zenix SEC固定相能与大多水相缓冲液兼容，如醋酸铵、磷酸盐、Tris等。Zenix SEC固定相能够承受高浓度盐，如2.0 M。同时Zenix SEC柱在有机溶剂中，如甲醇、乙醇、四氢呋喃、2,5-二甲基呋喃、二甲基亚砜等，水和有机溶剂混合相中均能保持稳定。
高蛋白回收率
Zenix SEC固定相为亲水性和中性，蛋白和其他生物分子与固定相之间的非特异性吸附可忽略。可抑制蛋白吸附到硅胶固定相表面的作用，从而能够实现蛋白高的回收率，在分离后能够保持蛋白的活性。酸性和碱性蛋白的代表BSA和溶菌酶的回收率能够高于95%。
