

Polyfect-C转染试剂
- P2011
- 英茂盛业
- 重庆市
- 现货
- P2011-0.5ml
- P2011-1ml
- 1199 元
- 2022-08-09 15:46:04
重庆英茂盛业生物科技有限公司
产品简介:
Polyfect-C转染试剂是新一代纳米转染试剂,适合用于多数贴壁动物细胞系,悬浮动物细胞系以及多数原代细胞。具有细胞毒性低,操作简便,血清和抗生素对转染无影响,质粒和转染试剂用量少等显著优点。该转染试剂操作简便,孵育时间短,转染效果可靠。
规格:
货号 |
规格 |
P2011-0.5 |
0.5ml |
P2011-1 |
1ml |
保存:
本品在4℃可保存3个月,如需长期保存可在-20℃冻存。
冻融后缓慢吹吸混匀,切勿剧烈震荡。
转染前注意事项:
- 转染密度以80%-95%比较合适。
- 如果长时间未使用转染试剂,使用前需吹吸混匀转染试剂。
- 转染复合物形成后血清和抗生素对转染无影响,但形成转染复合物过程中不能有血清和抗生素。
- 不同细胞培养装置的转染试剂和质粒用量见下表。表中的用量根据HEK293V细胞优化。如果用Polyfect-C转染其他细胞,也可以参照表中的量进行。
细胞培养装置 |
DNA用量(μg) |
稀释DNA的稀释液体积(μl) |
Polyfect-C转染试剂体积(μl) |
稀释Polyfect-C的稀释液体积(μl) |
细胞培养液总体积(ml) |
96孔板 |
0.1 |
5 |
0.2 |
5 |
0.1 |
24孔板 |
0.5 |
12.5 |
1 |
12.5 |
0.5 |
12孔板 |
1 |
25 |
2 |
25 |
1 |
6孔板 |
2.5 |
62.5 |
5 |
62.5 |
2 |
6cm皿 |
5 |
125 |
10 |
125 |
5 |
10cm皿 |
15 |
375 |
30 |
375 |
10 |
操作步骤:
下面以10cm平皿为例说明转染步骤。
- 转染前24小时,将293V细胞以4-5×106/10cm平皿密度接种,加入10ml培养基37℃,5% CO2培养。细胞转染前密度应达到90%。
- 吹吸混匀Polyfect-C转染试剂。
- 准备2个离心管,按以下顺序分别制备质粒和转染试剂稀释液。
离心管1(质粒DNA) |
|
离心管2(转染试剂) |
质粒15μg |
|
Polyfect-C转染试剂30 μl |
DMEM无血清培养基Xμl |
|
DMEM无血清培养基345μl |
总体积375μl |
|
总体积375μl |
1.充分混匀。
2.将转染试剂稀释液(离心管2)加入质粒DNA溶液(离心管1)中,立刻充分混匀。注意加入顺序非常重要。
3.室温孵育转染混合液5分钟。混合液可以在2小时内保持稳定。
4.将转染混合液逐滴加入步骤1准备的细胞培养皿,前后晃动培养皿,充分混匀。
5.37℃培养。
6.如果需要换液,可在转染后4-6小时进行,不会影响转染效果。
7.继续培养24-48小时进行细胞检测或其他操作。