

Super Fluor 680 SE (~Alexa Fluor 680 SE)
- 1035-1mg
- 北京富百科
- 北京市
- 现货
- 1mg
- 3095 元
- 2023-03-20 14:41:30
北京富百科生物技术有限公司
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产品介绍
Super Fluor 488,555, 647, 680, 750活化酯标记抗体
Super Fluor®为北京富百科生物技术有限公司注册商标,未经授权严禁使用!
1.产品简介
Super Fluor® 系列(可替代Alexa Fluor 系列)荧光探针,具有更强的荧光强度,更广的pH应用范围(pH 4~10), 更好的抗淬灭性。在生物荧光领域已逐渐替代FITC,Cy3, Cy5, Cy5.5, Cy7等荧光染料。 Super Fluor 750 NHS= Super Fluor 750 SE~Alexa Fluor 750 SE。。
表 Super Fluor 488,555, 647, 680, 750活化酯的性质参数
488
|
555
|
647
|
680
|
750
|
|
活化酯分子量
|
~900
|
~1250
|
~1300
|
~1150
|
~1300
|
最大吸收波长(nm)
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494
|
555
|
647
|
680
|
750
|
摩尔吸光系数(M-1cm-1)
|
71 000
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150 000
|
239 000
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184000
|
240 000
|
最大发射波长(nm)
|
524
|
565
|
665
|
702
|
775
|
A280nm /Amax
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11%
|
8%
|
3%
|
5%
|
4%
|
2. Super Fluor 标记抗体的参考方案:
1) 蛋白溶解:用0.1 M NaHCO3溶解至终浓度为2mg/mL
将1ml 去离子水加入84mgNaHCO3瓶中,配成1M 的碳酸氢钠溶液。振荡或吹打至完全溶解。该溶液pH 约8.3,2~6℃保存可用2 星期;若抗体是溶液,将抗体稀释至2mg/mL,再加入1/10 体积的上述碳酸氢钠溶液;若抗体是冻干粉,将1M 碳酸氢钠溶液用10 倍去离子水稀释成0.1M 后,用其将抗体溶成2mg/mL的溶液;
2)染料溶解:活化Super Flour SE染料固体粉末从冰箱放入干燥器中慢慢升至常温后,用无水DMSO(推荐使用SigmaAldrich货号276855)将染料配置浓度为1 mg/mL。
3)标记:在1mL蛋白溶液中缓慢加入适量染料溶液,(蛋白:染料摩尔比=1:20~50;质量比可在以下范围内优化10~200ug Super Flour SE 每毫克IgG抗体)。同时在暗处常温缓慢搅拌1小时。也可以直接将蛋白溶液直接加入染料的固体粉末的试剂瓶中,同时在暗处常温缓慢搅拌1小时。
4)纯化:用透析法或者葡聚糖Sephadex纯化产品后,产品冷冻干燥成粉末或在0.01 M PBS/2mM叠氮化钠溶液中,-20℃避光储存。
5)贮存:标记好的蛋白贮存于2~6℃,避光。若纯化的蛋白偶联物浓度小于1mg/mL,加入BSA 或其他稳定蛋白1~10mg/ml。在2mM 叠氮钠存在的情况下,2~6 度可保存几个月。保存更长时间,则需分装后-20℃保存。避免反复冻融,避光保存。
3.计算标记比例F/P值:
对于IgG 等大多数抗体来说,摩尔吸光系数为203000,F/P值在4~9 之间是最合适。
Super Flour 680标记蛋白F/P值计算:
1)用PBS 精确倍数稀释定量的少许纯化过的偶联蛋白,在1cm比色皿中测定280nm和680nm的光吸收;
2)计算样品中的蛋白浓度:蛋白摩尔浓度=(A280-(A650×0.05))×稀释倍数/203000
4. 活性染料稳定性与储存:
请注意:未开封的粉末在避光干燥-20℃可存放6月。其水溶液现配现用不能储存。任何溶解后的染料最好立即使用;无水的DMSO溶液-20°C保存最多2个星期。
特别提醒:
1) 本公司所有产品仅限于专业人员用于生命科学研究,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅!
2) 本公司所有产品必须由合格专业技术人员操作同时佩戴口罩/手套/实验服并遵守生物实验室安全操作规程!
产品参数
Name
|
Super Fluor 680 SE (~Alexa Fluor 680 SE)
|
||
---|---|---|---|
CAT#
|
1035-1mg
|
CAS#
|
N/A
|
Storage#
|
−20°C干燥避光
|
Shelf Life#
|
12个月
|
Ex(nm)#
|
680
|
Em(nm)#
|
702
|
MW#
|
N/A
|
Solvent#
|
Water or DMSO
|