哺乳动物细胞Cas9基因编辑服务

 

     

      英茂盛业有完善的CRISPR细胞编辑平台，可以实现对细胞基因敲除、基因敲入、定点突变等多种CRISPR基因编辑。在通常的重组法基因编辑的基础上，我公司开发了重组酶融合Cas9蛋白方案，大幅提高了重组效率。我们已具备完善的细胞基因编辑技术平台，有着丰富的基因编辑细胞株构建经验，可为您提供基因敲除、敲入、定点突变等多种类型的技术服务。

 

 

优势：

    更准确——我们采用蛋白、sgRNA、重组模板体外形成复合物直接电转细胞的方法进行基因编辑，Cas9蛋白不会对细胞基因组DNA进行长时间切割，大大降低了非特异编辑的可能性。

更高效——全部采用ssDNA重组模板，提高阳性率的同时降低细胞毒性。

更快——无需构建sgRNA表达载体就能进行基因编辑，缩短工期。

 

 

服务流程：

 

 

 

 

自主研发的高效CRISPR基因编辑技术 ：

    CRIPSR细胞基因编辑的主要障碍在于哺乳动物细胞的重组修复效率低下，修复产物中非特异修复的比例极高，造成筛选困难，阳性率低。

 

     我们为提高细胞重组修复效率进行了大量研究，最终在Cas9-重组酶融合蛋白方案上取得突破。经过改造的重组蛋白可以与ssDNA重组模板和Cas9蛋白切割产生的DNA断裂端接合，直接促进二者的匹配和重组，将细胞的重组修复效率提升数十倍。

 

 

 

 

噬菌体ssDNA合成技术：

     单链DNA重组模板较双链DNA重组模板有着细胞毒性低、特异性高、重组效率高等显著优势，但是长链ssDNA很难合成。为了攻克这一难题，我们优化了噬菌体合成技术，使噬菌体容量可达3kb，可以及其方便地获得大量ssDNA重组模板。

 

 

 

 

客户使用本产品发表文献：

Jiang, Ping, et al. "The expression of protease-activated receptors in esophageal carcinoma cells: the relationship between changes in gene expression and cell proliferation, apoptosis in vitro and growing ability in vivo." Cancer cell international 18.1 (2018): 81.

Yang, Zuozhang, et al. "Fluvastatin prevents lung adenocarcinoma bone metastasis by triggering autophagy." EBioMedicine 19 (2017): 49-59.