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单细胞转录组测序
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  • 2022-07-21 14:31:44

上海云序生物科技有限公司

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单细胞测序技术(single cell sequencing)是指在单个细胞水平上,对基因组、转录组、表观组进行高通量测序分析的一项新技术,它能够弥补传统高通量测序的局限性,揭示单个细胞的基因结构和基因表达状态,反映细胞间的异质性。


单细胞转录组测序
单细胞转录组测序技术广泛地应用于肿瘤、发育生物学、微生物学、神经科学、以及植物学等领域,具有广阔的应用前景。
技术原理:
BD Rhapsody™卡式芯片中有20W+的微孔,该数量级远大于样品细胞数量以确保一个微孔中只有单个细胞捕获。单细胞捕获过程中一个细胞与一个beads依次落入同一微孔,细胞裂解后释放mRNA与beads上的引物序列结合,进而使mRNA逆转录为cDNA,回收beads后抓取cDNA进行文库构建、测序和分析。

技术优势:
1)可实时监测细胞捕获效率和多细胞比例
2)一次性获得细胞数高达2万个的高通量单细胞测序数据
3)多细胞比例低至 0.47%/1000 个细胞
4)可同时检测表面蛋白、基因表达信息
5)细胞表面蛋白与基因表达联合分析可对细胞亚群精细分类


样品要求:
细胞数目:>1-2x105个;
细胞活率:>80%;
细胞直径:<30μm;
细胞悬液:细胞悬液中应避免存在细胞成团、细胞碎片或其它杂质等现象。同时避免溶液中残留核酸、EDTA、Dnase I等可能影响后续实验的物种。

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