核酮糖-1,5-二磷酸核酮糖羧化酶（Rubisco，EC 4.1.1.39）是植物光合作用中的一个关键酶，既控制着CO2的固定，同时又制约着碳素向Calvin循环和光呼吸循环分流，其活性的大小直接影响着光合速率。初始活性可反映体内酶的活化状态，总活性为体内已活化的酶加上潜在活化的酶活性。
在Rubisco的催化下，1分子的核酮糖-1,5-二磷酸（RuBP）与1分子的CO2结合，产生2分子的3-磷酸甘油酸（PGA），在3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脱氢酶的共同作用下，产生甘油醛-3-磷酸，并使还原型辅酶I（NADH）氧化。因此，通过检测340nm下NADH的下降速率，即可得出Rubisco的酶活性大小，为了使NADH的氧化和CO2的固定同步。本试剂盒加入了ATP再生系统。