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T7 RNA聚合酶
T7 RNA Polymerase
  • HCKE-T7001
  • 海澳斯凯尔
  • 江苏省苏州市
  • 一个月内
  • 20 μL(1 μg/ μL)
  • 1
  • 2023-07-11 14:02:23

苏州市海澳斯凯尔生物科技有限公司

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  • 英文名称
  • T7 RNA Polymerase
  • 别名
  • T7酶
  • 关键词
  • 聚合酶T7聚合酶RNA聚合酶

【适用范围】

T7 RNA聚合酶是一种来源于T7噬箇体的RNA聚合酶,对T7噬箇体启动子具有极高特异性。T7 RNA聚合酶是一种DNA 依赖性的RNA 聚合酶,能够在体外以单链或双链DNA为模板,从启动子开始催化模板DNA下游5'→3' RNA 合成,具有极高的转录效率。

【产品组分】

组分

体积

T7 RNA聚合酶(1mg/mL)

20 μL

5×Transcription Buffer

50 μL

1×Transcription Buffer: 40 mM Tris-HCl, pH 7.8, 20 mM NaCl2, 6 mM MgCl2, 2 mM spermidine-HCl, 10 mM DTT

【储存条件及效期】

于-20 ℃保存,有效期为24 个月。

【热失活】

70℃,10min

【反应体系及条件】

组分

体积

5×Transcription Buffer

10μL

ATP/GTP/CTP/UTP(25 mM each)

4μL

T7 RNA Polymerase(1 mg/ mL)

5μL

RNase Inhibitor(40 U/μl)

1μL

DNA 模板

1μg

DEPC-treated Water

Up to 50 μL

a. 37度孵育2小时

b. 如需去除DNA模板,加入2μL DNase I(1U/μl)终止反应

c. 终止反应:加入2 μL 0.2 M EDTA(pH8.0)或者 70°C反应10 min。

 

【注意事项】

1. 转录反应体系的配制应在无 RNase 污染的环境中完成,操作过程建议佩戴手套以及口罩,使用高压灭菌的水及枪头。

2. 该酶活性极强,对模板DNA纯度要求不高,PCR产物经乙醇沉淀后可直接用于转录。

 

 

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