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免疫组化试剂盒(抗兔二抗)
  • RY0080R
  • 上海睿远生物
  • 上海市
  • 现货
  • 100次
  • 1800
  • 2022-09-01 16:34:05

上海睿远生物医药科技有限公司

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免疫组化试剂盒(抗兔二抗)

免疫组化试剂盒(抗兔二抗)

 
   
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产品价格 1800 产品货号 RY0080R
规格 100T 备注: 10mL二抗

 

免疫组化试剂盒100T

原理: DAB 染色液是特别敏感的二步法免疫组化试剂盒,适合与兔或鼠源一抗配用。其主要过程为,一抗与切片中的靶抗原形成抗原抗体复合物,酶标羊抗鼠/兔 IgG 聚合物二抗(以多聚葡聚糖分子为骨架,辣根过氧化物酶与羊抗鼠/兔 IgG 形成的聚合物)与抗原抗体复合物中的一抗结合,再利用辣根过氧化物酶催化二氨基联苯胺(DAB)在抗原部位形成棕色显色。

产品货号:RY0080RM   

规格:100T

试剂盒组成:标羊抗IgG 聚合物二抗 4℃5mL DAB 显色剂(100x) A4℃100ul;DAB显色缓冲液 B 4℃10mL3%过氧化氢,10mL;

使用方法:DAB显色缓冲液DAB 显色剂(100x)=100:1; DAB显色工作液C=A+B

其他自备试剂:修复液,pbs,BSA等

 

操作流程如下:

石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯15min-二甲苯15min-无水乙醇5min-无水乙醇5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸馏水洗。

抗原修复:组织切片置于盛满EDTA抗原修复缓冲液PH8.0其他抗原修复液可以根据情况选择的修复盒中于微波炉内进行抗原修复,中火8min至沸,停火8min保温再转中低火7min此过程中应防止缓冲液过度蒸发,切勿干片。自然冷却后将片置于PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min

阻断内源性过氧化物酶:切片放入3%过氧化氢溶液(30%双氧水:纯水=1:9),室温避光孵育25 min,将片置于PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min

非特异性封闭:切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈(防止抗体流走),在圈内滴加3%BSA或者专用封闭液均匀覆盖组织,室温封闭30min

加一抗:轻轻甩掉封闭液,在切片上滴加按一定比例配好的一抗工作液(可选择PBS或者抗稀释液配制一抗工作液切片平放于湿盒内4°C孵育过夜。(湿盒内加少量水防止抗体蒸发)

加二抗:片置于PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加与一抗相应种属的标羊抗/IgG 聚合物二抗覆盖组织,室温孵育50min

DAB显色:片置于PBSPH7.4中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加新鲜配制的DAB显色工作液C,显微镜下控制显色时间,阳性为棕黄色,自来水冲洗切片终止显色。

石蜡切片免疫组结果判读

苏木素染细胞核为蓝色,DAB显出的阳性表达为棕黄色

 

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