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Heat-labile Uracil-DNA Glycosylase
  • E063
  • 近岸蛋白
  • 上海市
  • 现货
  • 100U
  • ¥680
  • 2023-02-03 09:35:03

苏州近岸蛋白质科技股份有限公司

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产品描述

热敏UDG(尿嘧啶-DNA 糖基化酶)能有效地水解单链或双链 DNA上的尿嘧啶,产生的缺嘧啶位点,在高温或高pH下,极易水解断裂。热敏UDG酶与常规UDG酶相比,可在较低温度(20℃)下起作用,且对温度敏感、易于灭活,避免了常规UDG酶灭活后可能存在的残留活性在常温下对含dU扩增产物的降解作用。升高温度和pH都会影响其水解活性。该产品对高温敏感,50℃以上就可以将酶完全失活。

产品用途

1)去除PCR残存污染;
2)去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基,5~10min降解含dU的DNA模板;
3)适用于30℃反应,50℃灭活,尤其适合反转录一步法防污染扩增。

保存条件

-20℃。

活性定义

1 单位指每分钟催化60pmol尿嘧啶从含尿嘧啶的双链DNA上释放所需要的酶量。检测条件为:50μl标准Taq反应缓冲液中,37℃条件下,30分钟从含0.2μg DNA(104-105 cpm/μg)的反应体系中释放[3H]-尿嘧啶的量来确定活性。

质量控制

经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带,PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。

使用建议

热敏UDG在多数PCR反应缓冲液中均有活性,但活性受高离子强度(>100 mM)抑制;
1×UDG Reaction Buffer条件下,30℃ 温育5-10min;
热失活:50℃加热10min或者95℃ 加热2min。

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