重大技术突破，8分钟的柱纯化血液DNA提取来袭

夏日炎炎，酷热的天气使人心情烦躁，这个时候再来个操作繁琐复杂的实验岂不是火上浇油。每到这种热得都不想动一下的时候，肯定有同学会想要是能“唰的一下”DNA就提好了那该多好啊。今天小新就为大家带来一款快速血液DNA提取试剂盒，与市场上常见的半小时操作时间起步的试剂盒不同，它的血液DNA提取时间缩短到了8分钟，打破了原来一直由新景生物保留的15分钟内提取血液DNA（全血DNA小量试剂盒，Cat. No. 3003050）的记录。更令人惊叹的是：在8分钟内提取的还是600 μl血液中的DNA！！！要知道像QIAGEN、天根等公司的血液DNA提取试剂盒，半小时提取的仅仅是200 μl血液中的DNA……接下来就让我们看下这个产品具体是怎么做到的，以及提取效果如何。

一、实验材料

人全血(EDTA抗凝)、快速全血DNA小量试剂盒（Simgen Cat.No.3003050）、2×PCR Mix（Simgen Cat.No.7003100）、1.3 kb β-球蛋白引物（F：TTAGGCCTTAGCGGGCTTAGAC/R：CCAGGATTTTTGATGGGACACG）

旋涡振荡器（越新仪器，XH-C）

台式离心机（eppendorf centrifuge 5415 D）

超微量分光光度计（Simgen Cat.No.sim100）

电泳仪（北京六一仪器厂，DYY-6C型）

PCR仪（Techne FPROG5Y Progene Thermal）

二、实验步骤

（一）DNA提取

1. 在1.5 ml离心管中加入600 μl Buffer L7，再加入600 μl的全血(EDTA 抗凝)，立即用力混合3~5次，使血样生成褐色沉淀物，再旋涡振荡30秒混合均匀，使沉淀物彻底分散开来。

2. 13200 rpm离心1分钟。

3. 将步骤2中的上清液全部倒入到核酸纯化柱（核酸纯化柱置于2 ml离心管中）中，盖上管盖，12000 rpm离心30秒。

4. 弃2 ml离心管中的滤液，将核酸纯化柱置回到2 ml离心管中，在核酸纯化柱中加入800 μl Buffer WB，盖上管盖，12000 rpm离心30秒。

5. 弃2 ml离心管中的滤液，将核酸纯化柱置回到2 ml离心管中，13200 rpm离心1分钟。

6. 弃2 ml离心管，将核酸纯化柱置于一个洁净的1.5 ml离心管中，在纯化柱中加入100 μl Buffer TE，盖上管盖，室温静置1分钟，12000 rpm离心30秒得到全血DNA。

（二）PCR扩增

PCR扩增体系：

扩增程序：

94℃,5 min，{94℃,45 sec；55℃,45 sec；72℃,1 min 30 sec}×30 cycles，72℃,10 min。

三、实验结果

1. 在超微量分光光度计上用Buffer TE调零，测量提取的DNA，结果如下：

2. 在1%的琼脂糖凝胶上加入5 μl提取的DNA/扩增产物进行电泳，结果如下：

四、分析与讨论

1. 从操作步骤可以计算出实际标明的时间总共是5分钟，加上步骤衔接过程需要损耗的3分钟，8分钟完成血液DNA提取货真价实，确实没有夸张成分。好奇心强的小伙伴还可以扫描二维码观看真实的操作视频：

2. 从浓度测量结果和图1电泳结果可知，用快速全血DNA小量试剂盒提取到的全血DNA纯度好，浓度高，条带清晰完整，无降解现象。

3. 由图2可知，在40 μl扩增体系中用18 μl提取的DNA（过量模板测试）作为模板进行扩增，扩增结果与阳性对照一致，并无观察到明显的抑制效果，进一步说明用快速全血DNA小量试剂盒提取到的全血DNA纯度好，抑制物少，完全能满足后续实验需求。

所以，赶紧向我司及Simgen的经销商们申请免费的试用装，体验快速（8分钟）、大量（多至600 μl）提取到高纯度全血DNA的美好过程吧----Simgen快速全血DNA小量试剂盒，让实验变得更简单、更快捷。