非整合型慢病毒包装

非整合型慢病毒简介

病毒载体介导的外源基因随机插入的可能风险之一是其可能整合到宿主细胞的原癌基因或抑癌基因内引发插入性诱变（insertional mutagenesis），导致癌基因的激活或抑癌基因的抑制，从而诱导癌症的发生。这些潜在的副作用已经引起人们的极大关注。因此，亟需发展非整合型慢病毒来解决基因治疗中的安全性问题。

整合酶缺陷型慢病毒（Integrase-deficient lentivirus，简称IDLV），也称为非整合型慢病毒（Non-integrating lentivirus，简称NILV），是由传统慢病毒改造而来。通过对慢病毒中编码整合酶的基因进行特定的点突变，整合酶的整合功能丧失。因此，这种IDLV不能插入宿主细胞的基因组，而是形成了环状附加体，存在于宿主细胞的细胞核中。此外，IDLV在分裂细胞中瞬时表达，但在非分裂细胞中稳定表达，适用于CRISPR基因编辑、iPS细胞研究等。

IDLV能够实现分裂细胞中瞬时表达，但在非分裂细胞中稳定表达，非常适用于CRISPR基因编辑、iPS细胞研究等，可以协助CAR-T、CAR-NK细胞的基因治疗递送。与其他非整合型病毒相比，IDLV还能装载比腺病毒更大的DNA片段，插入片段可达8kb以上，并可以使转导基因和沉默的靶基因更好的表达。

我司的非整合型慢病毒包装系统属于第四代包装系统，病毒核心基因分散在多个质粒中(pGag/Pol、pRev、pVSV-G和转移质粒)，从而降低了产生具有复制能力的病毒的可能性，进一步提高了生物安全性。同时，四质粒系统中的转移质粒可以包含可诱导基因，使得该基因表达系统可以条件性调控。

目前，我司可提供体内外实验所需的各种规格非整合型慢病毒，以满足客户多样化的实验需求。下面是具体服务内容(目录价仅为病毒包装费用)：

技术路线

舒桐非整合型慢病毒包装服务优势

1. IDLV载体与CRISPR/Cas9系统相结合，可以实现gRNA/Cas9在细胞内的瞬时表达。同时IDLV通过其广泛的细胞转导谱，具有广泛的细胞基因编辑潜力；
2. IDLV可以协助CAR-T、CAR-NK细胞的基因治疗递送。IDLV能够长期转导基因的表达，并且没有插入突变和遗传毒性的风险。因此，非整合型慢病毒尤其适用于基因编辑的递送，不会造成持续的脱靶效应，是一种相对安全的载体；
3. 传统慢病毒的随机整合会带来插入突变的风险，不利于基因治疗中的安全性评估报告，而IDLV不仅具有高效的基因表达，还能够解决基因治疗中的安全性问题，是临床研究中不可多得的基因递送载体；
4. IDLV是在慢病毒的基础上改造而来，可与任何慢病毒载体配套使用。同时，我司有多种表达载体、多种标签载体和多种报告基因，可供客户选择；
5. 与慢病毒相比，IDLV不会插入宿主基因组，减少对细胞表型和活力的影响；与其他非整合型病毒载体（如腺相关病毒载体）相比，可以装载更大的DNA片段，插入片段可达8kb以上，并可以使转导基因和沉默的靶基因更好的表达；
6. 我司可根据客户具体实验，由我司专业技术人员提供载体构建方案，提供特殊定制服务。