T4 RNA 连接酶
- HBP001101、HBP001102
- 武汉瀚海新酶
- 湖北省武汉市
- 现货
- 1KU
- 5KU
- 0 元
- 2022-04-30 11:26:04
武汉瀚海新酶生物科技有限公司
一键申请试用
咨询
加入意向单
联系方式
- 关键词
- 连接酶T4RNA
本产品是由大肠杆菌重组表达的 ATP 依赖性T4 RNA 连接酶（T4 RNALigase I）。此酶可催化寡核苷酸、单链 RNA 以及 DNA 分子间/内5’-PO4 和 3’-OH 形成磷酸二酯键。
产品组分
| 组分 | 不同规格各组分体积 | |
| T4 RNA 连接酶（10 U/μL） | 1KU | 5KU |
| 100ul | 0.5ml | |
| 10xReaction Buffer | 1.5ml | 7.5ml |
| Adenosine-5'-Triphosphate (ATP10 mM) | 200ul | 1ml |
| PEG 8000 | 1 ml | 5 ml |
产品储存
-20℃储存（避免反复冻融）。
储存缓冲液
50 mM KCl, 10 mM Tris-HCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50 % Glycerol, (pH 7.4 @ 25°C)
活性定义
活性定义单位：一个单位指在 37℃条件下，30分钟内将 1nmol 的 5’-[32P]rA16 转化为抗磷酸形态所需要的酶量。
质量控制
纯度≥95%，宿主 DNA 残留≤100 pg/mg, 宿主蛋白残留≤50 ppm，内毒素残留≤10 EU/mg,无 RNA 酶、核酸内切酶、核酸外切酶、蛋白酶残留，无菌，无支原体。
反应体系和条件
单链 RNA 分子间连接反应
1.根据如下表格配制反应体系：
| 组分 | 体积 |
| 无核酸酶水 | Up to 20 μl |
| ss RNA (20 μM) | 0.5 μl |
| 10 × Reaction Buffer | 2 μl |
| ATP（10 mM） | 1 μl |
| PEG 8000 | 8 μl |
| T4 RNA Ligase | 1 μl |
2. 混匀后，37℃孵育 30 分钟；
3. 65℃孵育 15min，可终止反应。
