细胞名称：小鼠杂交瘤细胞

• 平台编号: zl-041010
• 规格: 1×10⁶cells/T25培养瓶
• 细胞信息: SDOW-17
• 细胞特性
  
  1） 来源：小鼠
  
  2） 形态：上皮细胞样，悬浮生长
  
  3） 含量：>1x106 细胞数
  
  4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
  
  5)  用途：仅供科研使用。
  
  运输和保存
  
  干冰运输及复苏好存活细胞
  
  （1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
  
  （2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
  
  细胞接收后的处理
  
  1） 收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
  
  2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
  
  3） 悬浮细胞：T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟，弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中（加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基）。
  
  4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。  收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代 。
• 一．培养基及培养冻存条件准备：
  
  1） 准备DMEM培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。
  
  2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
  
  3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
  
  二． 细胞处理：
  
  1） 冻存细胞的复苏：
  
  将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
  
  2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
  
  对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
  
  悬浮状态下生长的细胞，可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态，一般情况下细胞密度维持在1×105~1×106个/mL（不同细胞对密度要求不同，）可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm，离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
  
  3） 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。