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细胞周期检测试剂盒
  • USBF00000035
  • 优瑞科技
  • 广西壮族自治区桂林市
  • 一周内
  • 100测试/盒次
  • 800
  • 2022-12-15 15:12:18

桂林优瑞生物科技有限公司

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  • 关键词
  • 流式细胞仪

【产品名称】细胞周期检测试剂盒
【产品型号】CY 10
【包装规格】100 测试/盒
【预期用途】
本试剂与流式细胞仪配套使用,用于确定分散细胞样本中,细胞分裂间期 G0/G1、S、G2/M 各期所占的比例,为研究者提
供一种快速、高效、准确的结果分析方法。
【检验原理】
    碘化丙啶(PI)具有与 DNA 和 RNA 结合的特性。PI 不能透过活细胞膜达到活细胞内部,因此染色前需要对活细胞进行膜通透性处理,如乙醇固定增加其通透性。

    染色时,染色液中含有 RNase A,可以降解细胞内的 RNA。渗透到细胞核内的 PI 以特异性的嵌入方式与 DNA 结合,在 488nm 激发光照射下,发射出 610—620nm 的橙色荧光。

    PI 和双链 DNA 结合后可以产生荧光,并且荧光强度和双链 DNA 的含量成正比;假设 G0/G1 期细胞的荧光强度为 1,那么含有双份基因组 DNA 的 G2/M 期细胞的荧光强度的理论值为 2,正在进行 DNA 复制的 S 期细胞的荧光强度为 1-2 之间。

    因此,利用流式细胞仪检测碘化丙啶染色的细胞样本,可以直观的反映细胞内 DNA 的含量及 G0/G1、S、G2/M 各期所占的比例。

【储存条件及有效期】
储存条件:染色缓冲液、PI 染色液避光置于 2℃~8℃环境下保存;RNase A 于—20℃环境下保存。
有效期:未开封试剂盒自生产日期起,在规定存储条件下可稳定保存 18 个月;试剂开瓶使用后,在规定存储条件下可保
存 6 个月。
【适用仪器】
带有 488 nm 激发光源的流式细胞仪。如 Beckman Coulter 公司的 DxFLEX 和优利特 BF-700 B4R2、BF-700 B5R2、BF-700 B5R3
机型的流式细胞仪。
【样本要求】
1. 本试剂盒适用于检测培养的悬浮细胞或贴壁细胞;若要检测组织块标本,则需将组织块标本处理成单细胞悬液。
[1] 2. 流式细胞仪检测时,待分析样本细胞的总数量应不低于 1×10
5个,合适的样品浓度范围为 5×10
5至 5×10
6细胞/mL。
3. 样本染色前,需用 95%乙醇在 4℃下至少固定 2 小时,固定 12-24 小时染色效果更佳。
4. PI 染料存在荧光淬灭现象,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭;样本染色后宜在 24 小时内完成流式检测。
5. 本试剂盒未提供 PBS 及 95%乙醇,实验时需自备。

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