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荧光定量PCR(QPCR)
  • AX-S014
  • Aoxing
  • 湖北省武汉市
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  • 2022-05-18 16:30:28

武汉傲星生物科技有限公司

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实验概念

RT-PCR即逆转录pcr,其原理是提取组织或细胞中的总RNA,利用Oligo(dt)或随机引物反转录,获得cDNA模板,进一步通过PCR反应获得目的基因产物或检测其表达水平。与其他技术相比,RT-PCR技术更加灵敏易于操作,在细胞/组织基因表达水平的半定量检测,特定基因cDNA克隆及RNA病毒检测等分子生物学领域得到广泛应用。

实验流程

样本接收→引物合成→提取总RNA→RNA浓度测定→逆转录成cdna→荧光定量PCR→数据分析

实验结果

扩增完毕后,进入结果分析界面,看CT值、起始拷贝数、标准偏差等,如果是SYBR做的话,再看下溶解曲线。以β-actin为内参照基因,与对照组相比,得到目的基因表达的相对定量值(RQ值),将RQ值用于统计分析。

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