裸鼠成瘤
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- 2022-05-23 14:10:35
安徽乐奥贝生物技术有限公司
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裸鼠成瘤模型
由于裸鼠的免疫缺陷，在一定情况下，不排斥来自异种动物的组织移植，因此，可用其建立理想的人类肿瘤可移植实验动物肿瘤模型。
实验步骤
1.细胞复苏
从液氮中取出冻存的U87-MG细胞，迅速放入37℃水浴箱中，快速融化，加入含10%胎牛血清的DMEM/High培养基，接种于T25 培养瓶中，37℃，5％CO2孵箱常规培养传代。
2.细胞传代培养
弃培养瓶中旧培养液，用无菌PBS冲洗两遍，将胰蛋白酶-EDTA 1 ml加入到培养瓶中消化细胞，倒置相差显微镜下观察，待镜下细胞出现筛网状空隙时倒掉胰酶，加入含10%胎牛血清的DMEM/High培养基至覆盖培养瓶底，移液管反复吹打，使细胞悬浮，将细胞悬液移入离心管中1000r/min离心5min，弃上清液，按1:2~1:4传代，在37℃、5%CO2孵箱进行培养，2~3天换液，选择对数期的细胞用于实验。
3.接种制备
加入无菌PBS，轻轻吹打细胞沉淀，混匀成细胞悬液，细胞计数，使细胞密度达到 1×107个/ml；在超净台中，用75%酒精消毒裸鼠背部，于皮下（大部分选择腋下接种）注射0.1 ml细胞悬液。
4.结果观察
一般接种7-10天左右可以见到皮下开始出现肿块。
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