产品介绍
原代细胞经过一定数量的增殖,和一定次数的分裂后达到复制衰老的状态,从而限制了衰老或受损细胞的增殖。GeneCopoeia提供细胞永生化试剂,利用重组慢病毒携带基因,如simian virus 40 (SV40)大T抗原和人端粒酶逆转录酶蛋白(hTERT)诱导永生化,可显著延长原代细胞的寿命。
        GeneCopoeia Lentifect™ 纯化慢病毒生产经过标准的实验流程,使用高质量质粒DNA提取试剂盒、EndoFectin™ 转染试剂及TiterBoost™ 慢病毒滴度增强试剂。使用第三代自失活包装系统,符合2级生物安全等级的要求。
1. 永生化慢病毒由CMV/EF1α启动永生化诱导基因的有效表达,并带有筛选抗性(可选)。
2. 提供25 μl*4管约108 TU/ml的慢病毒。慢病毒进行干冰寄送,请收到后立即放到-80℃保存。避免反复冻融影响病毒滴度。
3. 慢病毒表达结构经过全长测序、酶切、用基因特异性引物和载体特异性引物进行PCR大小验证。慢病毒产品无细菌、真菌及常见支原体污染。
3. 慢病毒表达结构经过全长测序、酶切、用基因特异性引物和载体特异性引物进行PCR大小验证。慢病毒产品无细菌、真菌及常见支原体污染。
 
SV40 large T antigen
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| 货号 | 产品 | 类型 | 描述 | 启动子 | 报告/标记 | 价格(¥) |  
| LP723-100 | SV40大T抗原-Lv115 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | EF1a | Hygro |  |  
| LP724-100 | SV40大T抗原-Lv153 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | CMV | N/A |  |  
| LP725-100 | SV40大T抗原-Lv156-01 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | EF1a | N/A |  |  
| LP742-100 | SV40大T抗原-Lv105 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | CMV | Puro |  |  
| LP743-100 | SV40大T抗原-Lv156 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | EF1a | Puro |  |    | 
 
SV40 small T & large T antigen
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| 货号 | 产品 | 类型 | 描述 | 启动子 | 报告/标记 | 价格(¥) |  
| LP721-100 | SV40大T&小T抗原-Lv105 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | CMV | Puro |  |  
| LP722-100 | SV40小T&大T抗原-Lv156 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | EF1a | Puro |  |    | 
 
hTERT
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| 货号 | 产品 | 类型 | 描述 | 启动子 | 报告/标记 | 价格(¥) |  
| LP726-100 | hTERT-Lv105 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | CMV | Puro |  |  
| LP727-100 | hTERT-Lv115 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | EF1a | Hygro |  |  
| LP728-100 | hTERT-Lv152 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | CMV | Hygro |  |  
| LP729-100 | hTERT-Lv153 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | CMV | N/A |  |  
| LP730-100 | hTERT-Lv156 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | EF1a | Puro |  |  
| LP744-100 | hTERT-Lv156-01 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | EF1a | N/A |  |    | 
 
c-Myc
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| 货号 | 产品 | 类型 | 描述 | 启动子 | 报告/标记 | 价格(¥) |  
| LP741-100 | c-Myc-Lv105 Lentifect™ 慢病毒颗 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml c-Myc 纯化慢病毒颗粒,可直接用于转导实验, 100 µl | CMV | Puro |  |    | 
 
CDK4
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| 货号 | 产品 | 类型 | 描述 | 启动子 | 报告/标记 | 价格(¥) |  
| LP731-100 | CDK4带嘌呤霉素标记-Lv105 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | CMV | Puro |  |  
| LP732-100 | CDK4-Lv153 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | CMV | N/A |  |    | 
 
HOX
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| 货号 | 产品 | 类型 | 描述 | 启动子 | 报告/标记 | 价格(¥) |  
| LP733-100 | HOXB8带嘌呤霉素标记-Lv105 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | CMV | Puro |  |  
| LP734-100 | HOXB8-Lv153 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | CMV | N/A |  |  
| LP735-100 | HOXA9带嘌呤霉素标记-Lv105 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | CMV | Puro |  |  
| LP736-100 | HOXA9-Lv153 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | CMV | N/A |  |  
| LP737-100 | HOXA10带嘌呤霉素标记-Lv105 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | CMV | Puro |  |  
| LP738-100 | HOXA10-Lv153 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | CMV | N/A |  |    | 
 
Bmil
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| 货号 | 产品 | 类型 | 描述 | 启动子 | 报告/标记 | 价格(¥) |  
| LP739-100 | Bmi1带嘌呤霉素标记-Lv105 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | CMV | Puro |  |  
| LP740-100 | Bmi1-Lv153 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | CMV | N/A |  |    | 
 
HPV-16 E6/E7
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| 货号 | 产品 | 类型 | 描述 | 启动子 | 报告/标记 | 价格(¥) |  
| LP745-100 | HPV-16 E6-E7带嘌呤霉素标记 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | CMV | Puro |  |  
| LP746-100 | HPV-16 E6-E7 Lentifect™ 慢病毒颗粒 (25 µl x 4 管)
 | Standard | ≥ 108 TU/ml 可直接用于转导实验, 100 µl | CMV | N/A |  |  | 
细胞永生化实验操作
- 原代细胞铺板,6孔板,0.5-2 x105/孔
- 将冻存在-80℃的慢病毒取出,冰浴融化
- 使用GFP慢病毒感染原代细胞,明确细胞MOI,以及明确细胞药物筛选最小致死浓度后,使用永生化慢病毒感染细胞。
- 感染第二天,更换新鲜细胞培养液,继续培养。
- 感染72小时后,更换带有筛选抗性的新鲜细胞培养液,继续培养。
- 得到筛选抗性阳性细胞克隆后,即可进行永生化测试。