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Bsu DNA 聚合酶(大片段)
  • HMD002001
  • 武汉瀚海新酶
  • 湖北省武汉市
  • 现货
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  • 0
  • 2022-04-30 11:30:39

武汉瀚海新酶生物科技有限公司

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  • 关键词
  • BsuDNA聚合酶

Bsu DNA 聚 合 酶 , 大 片 段 ( Bsu DNA Polymerase, Large Fragment)由克隆有来自 Bacillus subtilis DNA 聚合酶 I 基因的重组E. coli 菌株表达并经过多步纯化精制得到。该酶保留了 Bacillus subtilis DNA 聚合酶 I 的 5´→3´ 聚合酶活性,但是缺失了 5´→3´ 核酸外切酶结构域(截去了 Bacillus subtilis DNA 聚合酶 (Bsu) I 基因的前 296 个 AA,因而缺失了 5´→3´ 核酸外切酶结构域),同时该大片段自身缺乏 3´→5´ 核酸外切酶活性。

产品组分

组分 200U 1000U
Bsu DNA 聚合酶,大片段(5 U/μL) 40μL 200μL
10×Bsu Reaction Buffer 1mL 1mL
 

运输与保存方法

-20℃储存,有效期 1 年(避免反复冻融)。

储存缓冲液

25 mM Tris-HCl (pH 7.4), 50 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM dithiothreitol and 50% glycerol.

活性定义

在 37 ℃条件下,30 min 内使 10 nmol 的 dNTP 掺入到酸性不溶物所需要的酶量定义 为 1 个活性单位(U)。

热失活

75 ℃,20 min

质量控制

核酸外切酶残留检测:50 U 的本品和 1 μg λ-Hind III digest DNA 在 37℃下反应 4 小时,DNA 的电泳谱带不发生变化;

核酸内切酶残留检测:50 U 的本品和 1 μg λDNA 在 37℃下反应 4 小时,DNA 的电泳谱

带不发生变化;

切口酶残留检测:50 U 的本品和 1 μg pBR322 在 37℃下反应 16 小时,DNA 的电泳谱带不 发生变化;

RNase 活性:50 U 的本品和 1.6 μg MS2 RNA 在 37℃下反应 16 小时,DNA 的电泳谱带不 发生变化;

大肠杆菌 DNA 残留检测:5 U 本品中残留的 核 酸 经 E.coli 16s rDNA 特 异 性 的 TaqMan qPCR 检测,E.coli 基因组残留≤1 拷贝。

反应条件

1X Bsu Reaction Buffer

10 mM Tris-HCl (pH 7.9 @ 25°C)

50 mM NaCl

10 mM MgCl2

1 mM DTT

应用

  • 随机引物法标记
  • cDNA 第二条链的合成
  • 单个 dA 的加尾
  • 链置换的 DNA 合成

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