Super Green I GelStain核酸染料(~Sybr Green)电泳级
- 001-100uL
- 北京富百科
- 北京市
- 现货
- 100μL/支
- 580 元
- 2023-03-17 14:23:54
北京富百科生物技术有限公司
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产品介绍
Super Green I GelStain核酸染料
本品Super Green（可替代Sybr Green）是用 DMSO 溶解，因为 DMSO 溶点是 18.3℃，使用前请放置到室温充分溶解。
Super Green I 核酸染料特点：
1. 相对安全：尽管可以穿透细胞膜进入细胞内，属于花菁染料，使用相对安全，富百科AMES实验显示在工作浓度(凝胶染色浓度)下没有发现致突变性，可以代替致癌物溴化乙锭EB作为各种核酸电泳的染色剂。
2. 高灵敏：紫外凝胶透射仪下灵敏度高 EB 染色法 5-10 倍，可见光透射仪下的灵敏度比 EB 染色法高20~30 倍。
3. 信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。
4. 操作简单：无须脱色或冲洗，即可用紫外凝胶透射仪观察或可见光透射仪观察。
5. 适用范围广：可适用于多种电泳分析，如琼脂糖凝胶电泳和 PAGE 凝胶电泳。
6. 使用方便：不影响其它修饰酶作用(如：Taq 酶、内切酶、T4 连接酶、反转录酶等)。
Super Green I 核酸染料使用方法：
1.胶染法(用法同EB)(推荐方法，见图1)
1) 制胶时加入 Super Green I 核酸染料。冷却胶到 50℃左右，每 100ml 胶中加入1-3µl Sybr Green I 核酸染料（见图 1）。
2) 按照常规方法进行电泳即可。
3) 用紫外凝胶透射仪或可见光透射仪观测。蓝光可透过玻璃， 观测聚丙烯酰胺凝胶时，可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入可见光透射仪内观测。
*注：此方法染色能准确确定片段分子量且用量较少。1ml 染料可以做 1000 块10 ml 胶，每块胶点 50 个样，可做 50000 次。
2.点染法(见图3)
1) 该方法适于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳。
2) 工作液的配制：用电泳缓冲液将10000×的Super Green I 稀释100倍，即为Super Green I 工作液。Super Green I 工作液可以置2～8℃保存一个月以上, 浓缩液在-20℃保存半年。
3) 制胶：按常规方法制胶，不含任何染料。
4) 样品染色：向分析样品中加入Super Green I工作液和载样缓冲液，室温放置10分钟，使Super Green I与样品中DNA充分结合。Super Green I 工作液加入量为总上样量的1/5～1/10。
5) DNA Marker染色：将5μL DNA Marker、5μL DNA Marker稀释液和1μLSuper Green I 工作液混匀，室温放置5分钟，使Super Green I 与DNA充分结合。
6) 上样、电泳：按常规操作。用紫外凝胶透射仪或可见光透射仪观测。蓝光可透过玻璃， 观测聚丙烯酰胺凝胶时，可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入可见光透射仪内观测。
*注：用点染法染色时，灵敏度最高，染料用量最少。通常点一个样加入 1µL 即 可，可以使用 10000 次, 但大片段稍有滞后现象，如果需要更准确确定分子量(与Marker 对比)，建议使用胶染法。
3.泡染法
1) 按照常规方法进行制胶，其中不含任何染料。
2) 用 pH 7.0 - 8.5 的缓冲液(如：TAE, TBE)，按照 1﹕1000 的比例稀释 Sybr Green I
3) 核酸染料，混匀，制成染色溶液。
4) 将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。 室温振荡染色 10-30 分钟，染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直 接在玻璃平皿上染色，将配好的稀释溶液轻轻地倒在胶板上，让稀释液均匀地覆 盖整个胶板，并染色 30 分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理（避免染料 吸附在玻璃表面上）。
5) 用紫外凝胶透射仪或可见光透射仪观测。蓝光可透过玻璃， 观测聚丙烯酰胺凝胶时，可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入可见光透射仪内观测。
*注：用泡染方法染色时，可以精确确定核酸片段分子量。但染料用量是三种方法中用量最大的。
几种染色方法特点比较:
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染色方法 特点
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灵敏度
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染料用量
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确定片段分子量精确度
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胶染法
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较高
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较少
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较高
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点染法
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很高
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最少
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大片段稍有滞后
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泡染法
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较高
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最多
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最高
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点染+胶染法
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最高
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较多
|
大片段稍有滞后
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Super Green I 核酸染料使用注意事项：
1. Super Green核酸染料样品点染方法中，电泳不要超过 2 小时，以免核酸染料从 DNA/RNA 上分离出来，产生弥散状条带。
2. 用点染方法染色时，条带稍有滞后现象，如果需要确定片段精确分子量（和 Marker 对比），建议用胶染法和泡染法。
3. 常规用酒精沉淀核酸过程中，Super Green I 核酸染料可以全部从核酸上去掉。
4. DNA电泳请选择 SuperGreen I 染料，RNA 电泳请选择Super Green II染料，两种染料不通用。
5. Super Green I 核酸染料对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染 色等使用过程中用聚丙烯类容器。
6. 可以加Orange Red 作为标记. pH值在7.5-8.3之间,不要微波加热,加入热胶的温度低于50度
注意事项： 所有产品仅限用于研发，必须生物技术人员操作同时佩戴口罩/手套/实验服并遵守生物实验室安全操作规程！
Super Green I 核酸染料不同使用方法电泳图谱：
Fig.1胶染法Fig.1 DNA marker 2000 10, 5, 2.5 per lane Fig.2胶染+点染 Fig.2 DNA Marker 2000 incubate at RT for 3~5min
EB Super Green I DNA Stain EB Super Green II RNA Stain
Fig3. 点染法Fig.3 Volume ration of Dye/DNA marker 2000 Fig.4 Incubate at RT for 3~5min then load 0.5,1,1ug per lane
=1:10 incubate at RT for 3~5min then load 5,2,1uL per lane. Fig4. Sybr Green II点染(RNA)
特别提醒：
1) 本公司所有产品仅限于专业人员用于生命科学研究，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅。
2) 本公司所有产品必须由合格专业技术人员操作同时佩戴口罩/手套/实验服并遵守生物实验室安全操作规程！
产品参数
| Name | Super Green I GelStain核酸染料(~Sybr Green)电泳级 | ||
|---|---|---|---|
| CAT# | 001-100uL | CAS# | N/A |
| Storage# | 4°C干燥避光保存 | Shelf Life# | 12个月 |
| Ex(nm)# | 497 | Em(nm)# | 525 |
| MW# | N/A | Solvent# | DMSO |
