外泌体miRNA检测

一、技术简介

实时荧光定量PCR技术是在普通PCR反应体系中加入荧光试剂，利用荧光信号实时检测PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR能够专一、灵敏、快速、高重复性地精确定量起始模板浓度。由于成熟的miRNA仅为21-23 nt，不能通过传统方法进行发转录，进而进行定量。本公司可设计反转录引物与成熟miRNA结合，形成反转录引物/成熟miRNA复合物，并在miRNA的5’末端延伸。这样就得到一个较长的反转录扩增因子，为进一步做实时定量PCR提供了符合要求的摸板。本公司通过特殊设计的茎环结构的反转录引物，配合实时定量PCR引物及探针可以精确检测微量样品中miRNA表达水平，也可以用终点PCR法定性检测。

二、实验流程

1. 提取RNA。

2. 消化样品中的DNA。

3. RNA反转录为cDNA。

4. 利用相对定量的方法分析目的基因表达量的情况。

5. 定量 PCR检测。

6. 分析扩增曲线和溶解曲线。

三、服务说明及结果

1. 客户提供：样本。 

2. 公司提供：高质量的RNA、扩增曲线图、熔解曲线图、完整报告。

3. 实验周期：5-10个工作日。