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人原代直肠上皮细胞
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  • 2023-10-24 16:41:39

北京北纳创联生物技术研究院

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人原代直肠上皮细胞基本信息









































培养基 88%原代上皮细胞基础培养基+10%FBS+1%P/S+1%原代上皮细胞培养添加剂
传代方法 复苏步骤:①冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速没入37℃水浴锅,摇晃冻存管加速溶解,以1min内全部溶解为宜;②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9mL完全培养基的离心管内,1000-1200rpm离心5min,弃去上清液,用1-2mL完全培养基重悬细胞。③将细胞悬液加入到含有5-6mL完全培养基的T25瓶中,放入培养箱培养。
细胞传代:①将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(可用吸管吸起些许胰酶轻轻吹打细胞层某处,肉眼可见细胞层脱落,即消化完成,否则继续消化),直接吸掉胰酶,加入5-6mL完全培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。③将细胞悬液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。;④注意培养基pH值变化和细胞密度,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%-90%时,重复传代操作或者冻存。
生长条件 培养温度37℃;气体环境5%CO2+95%空气;
生长特性 贴壁生长
存储条件 液氮
安全等级 0
形态 上皮细胞样,多角形,短梭形,单层贴壁生长
共享方式 公益性共享


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