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蛋白酶K, 冻干粉,≥30 units/mg protein[500mg]
Proteinase K
  • KB02044-500mg
  • qianlan
  • 广东省深圳市
  • 一周内
  • 500mg
  • 988
  • 2022-07-20 15:44:54

千蓝(深圳)生物科技有限公司

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  • 英文名称
  • Proteinase K
  • CAS号
  • 39450-01-6
  • 起订量
  • 1
产品简介:
英文名称:Proteinase K
CAS:39450-01-6
外观(性状):白色冻干粉末或块状物
比活:≥30u/mg protein
单位:支
来源:微生物
储存条件:−20 ℃

 

产品信息

蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。拥有典型的丝氨酸活性位点:Asp39–His69–Ser224。切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。

该酶有两个Ca2+结合位点,它们离酶的活性中心有一定距离,与催化机理并无直接关系。然而,如果从该酶中除去Ca2+,由于出现远程的结构变化,催化活性将丧失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。所以,蛋白酶k消化过程中通常加入EDTA(以抑制依赖于Mg2+的核酸酶的作用)。但是,如果要消化对蛋白酶k具有较强耐性的蛋白,如角蛋白一类,则可能需要使用含有1mmol/l Ca2+而不含EDTA的缓冲液。在消化完毕后、纯化核酸前要加入EGTA(ph8.0)至终浓度为2mmol/l,以鳌合Ca2+

 

酶活力单位定义

37,以血红蛋白为底物,1分钟内可以产生相当1微摩尔酪氨酸Folin阳性的氨基酸或多肽的蛋白酶K的量,定义为一个单位蛋白酶K酶活力。

 

分子量:28,900 Da

 

最适pH7.5-9.0

 

等电点:8.9

 

蛋白酶K在很宽的pH范围内有效,有效的pH范围为pH4.0-12.5,最佳pH范围为pH7.5-8.0。 最佳反应温度为65,但在65或更高的温度蛋白酶K自身的也非常迅速地降解。很多时候反应温度选择50-55 

0.2-1%SDS或约10mM尿素存在的情况下,蛋白酶K显示更高的酶活性。蛋白酶K的常用工作浓度为0.05-1mg/ml,根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH是否适合、温度是否适合等因素确定具体的工作浓度。

EDTA等螯合剂或SDS等去垢剂均不能使之失活。

 

配制说明

10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 10 mM CaCl2缓冲液配制成20mg/ml蛋白酶K溶液,分装冻存在-20℃

 

保存及稳定性

冻干粉在-20℃下可保存三年以上。

 

用途:

1. 主要用在基因诊断试剂盒、基因组DNA提取试剂盒、RNA提取试剂盒中去除DNA和RNA制备中的核酸酶。

2. 可以于提取组织中非蛋白成份降解含有蛋白质的杂质,譬如DNA疫苗和肝素的制备等。

3. 还可制备脉冲电泳的染色体DNA及蛋白质印迹。

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