产品描述

Seplife G25 F葡聚糖层析介质是一种具有三维网状结构的高分子化合物，它是由葡聚糖加入交联剂环氧氯丙烷通过醚键互相交联聚合而成，交联度越大，网孔结构就越紧密，吸水后的体积膨胀就越小，能允许进入层析介质内部的分子的分子量也就越小，反之亦然。层析时，大于层析介质孔径的大分子，被阻于凝胶相外，沿着层析介质颗粒之间的间隙走，下移速度最快，故最先洗脱下来，中等大小的分子进入部分层析介质孔中，洗脱速度次之，而小分子因为能够进入全部层析介质孔中，受到阻力最大，故最后被洗脱下来，由此，物质得到分离和纯化。Seplife G25葡聚糖层析介质分离范围为1000~5000，适用于脱盐、肽与其它小分子的分离。

产品属性参数

产品牌号	Seplife G25 F
外观	白色球状，无臭无味
粒径（干，μm）	20～80
粒径（湿，μm）	40～140
溶胀度	4~6ml/g干粉
耐压（MPa）	0.24
最高流速（cm/h）	480
pH稳定性	2~13
化学稳定性	在以下溶液中稳定：6M盐酸胍；8M尿素；24%乙醇；0.2M NaOH；0.2M HCl；1M乙酸；1% SDS；30%异丙醇；30%乙腈
应用	分离范围为1000~5000，适用于脱盐、肽与其它小分子的分离

 

说明书

 

交联葡聚糖凝胶微球G25的排阻极限测定

 

Seplife G25排阻极限

样品	保留体积(ml)	分子量	Log M	Kav
苄醇	114.81	108	2.03	1.00
PEG400双苄基醚	98.43	580	2.76	0.80
PEG600双苄基醚	81.60	780	2.89	0.60
PEG1000双苄基醚	65.72	1180	3.07	0.40
PEG1540双苄基醚	55.14	1620	3.21	0.28
PEG4000双苄基醚	33.81	4180	3.62	0.02
PEG6000双苄基醚	32.64	6180	3.79	0.00
PEG7000双苄基醚	32.63	7180	3.86	0.00
PEG10000双苄基醚	32.42	10180	4.01	0.00
PEG20000双苄基醚	32.41	20180	4.31	0.00

使用方法

4.1预处理

葡聚糖凝胶过滤层析介质一般是干粉状态，使用前必须在过剩的缓冲溶液中进行溶胀（室温溶胀过夜，或者在沸水中溶胀1h，避免使用磁力搅拌、药匙或者玻璃棒搅拌造成填料损坏）。溶胀后，使用缓冲液进行调节，形成浓稠的浆液，75%（体积百分比）左右，再进行脱气。

4.2 装柱

装柱按照标准操作规程操作。装柱前，必须保证每种材料都处于工作温度，缓冲液、填料的温度须一致（室温）。葡聚糖凝胶过滤层析介质遵从Darcy法则，如果流速加倍，则柱压也会加倍。

4.3平衡

使用2~5倍柱床体积的上样平衡液平衡柱子，务必使流出液的电导和pH同上样缓冲液的电导和pH完全一致。

4.4上样

（1）介质对样品组分的分离是按组分分子量大小进行的，分子量大的先流出来。

（2）凝胶过滤的上样量一般为5%的柱床体积，我们建议初次上样控制在1-2%的床体积，视分离情况可以调整；脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积，柱高的选择也与分离要求相关，柱高控制在40-50 cm 以下，过高的凝胶层会引起较大的反压，应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制，脱盐时高径比为5：1即可。

（3）样品中如有杂质或沉淀应该在上样前过滤或离心除去，样品的粘度不能过高，否则影响分离效果。

4.5洗脱

可以采用无盐水，也可以采用用平衡缓冲液做洗脱剂进行洗脱。在平衡缓冲液中加入NaCl等梯度洗脱或者盐梯度洗脱都可以完全分离。

4.6在位清洗

凝胶使用10次后作一次CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氢氧化钠反向洗4个柱床体积，再以至少3个柱床体积平衡缓冲液再生。

4.7存储

干粉保存在4~30℃，干燥、通风、清洁处；溶胀后的介质保存在4~8℃，20%乙醇溶液中，避免与氧化剂接触，不可冷冻。

4.8运输

运输中避免日晒、雨淋、重压，严禁与有毒、有害物品混运。

5.注意事项

（1）样品必须澄清没有颗粒。

（2）样品与层析介质必须用洗脱缓冲液彻底平衡后，才能进行柱层析。 

（3）所装的柱床必须表面平整，无沟流及气泡，否则应重装。

（4）洗脱过程中应严格控制流速，且勿过快。

（5）加样及整个洗脱过程中，严防柱面变干。

（6）本品应避免与氧化剂接触，避免长时间暴露在空气中。 

订货信息

产品牌号	货号	包装规格
Seplife G25 F	D1007210F	25g
	D1007211F	100g
	D1007212F	500g
	D1007213F	1kg
	D1007214F	5kg
	D1007215F	10k