应用案例:
实验样本:大肠杆菌菌液(OD600=2.221,内含pET-28α质粒)
实验方法:用四个不同品牌质粒试剂盒(A、B为磁珠法,C为柱式法,D:海狸磁珠)分别提取1mL、5mL菌液,洗脱体积100μL。
实验结论:紫外分光光度计进行浓度测定及琼脂糖凝胶电泳测试核酸质量。所有品牌中,海狸质粒试剂盒提取质粒总量最高,琼脂糖凝胶电泳核酸条带最亮。
图1 采用不同品牌试剂盒提取1mL和5mL菌液中的质粒,其产物采用Nanodrop检测浓度
图2 不同品牌试剂盒质粒提取产物进行琼脂糖凝胶电泳检测数据
实验样本:大肠杆菌菌液(OD600=2.221,内含pET-28α质粒)
实验方法:用海狸质粒提取试剂盒对5mL、20mL、50mL菌液进行质粒提取,对应洗脱液体积为100μL、400μL、1mL。
图3 海狸试剂盒在不同体积菌液质粒提取
图4 不同体积菌液质粒提取琼脂糖凝胶电泳图
实验结论:使用海狸质粒提取试剂盒对不同体积菌液进行质粒提取,针对小、中、大体积样本,质粒提取量等比增加,且完整度高、无杂带。