翻译后修饰蛋白质组
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- 2023-05-15 16:43:10
上海爱谱蒂康生物科技有限公司
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方法概念
蛋白质磷酸化修饰（Phosphorylation）是生物体内最重要的共价修饰方式之一，是目前分布最多、也是最广泛研究的修饰，其发生过程是在激酶（kinase）催化下，将ATP的磷酸根基团转移到蛋白的氨基酸（Ser、Tyr、Thr）侧链上。蛋白质的磷酸化和去磷酸化这一可逆过程调节着包括细胞增殖、发育、分化、信号转导、细胞凋亡、神经活动、肌肉收缩及肿瘤发生等过程在内的所有生命活动。发生磷酸化修饰的氨基酸上共价连接磷酸基团，其分子质量会增加发生79.97Da。利用质谱可精确测定分子量是否发生79.97Da的质量偏移，从而检测磷酸化修饰肽段及位点。 label free磷酸化蛋白组学通过富集（如TiO2）酶解得到的修饰肽段，基于QE HF-X质谱仪，通过数据依赖性采集-同步累积连续碎裂（ddaPASEF）扫描模式进行差异磷酸化蛋白质组学分析。
技术特点
1. 无需昂贵的同位素标签标记，实验耗费低，操作简单；
2. 对样本的操作少，并且不受样本数目限制；
3. 可以检测不同组样本中有无差异的蛋白变化；
4. 样本需求量少
应用场景
1. 细胞通信、生长和增殖、细胞周期调控；
2. 癌变的发生和转移、神经传导；
