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m6A甲基化pcr验证(MeRIP-pcr)
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  • 2022-12-01 10:20:36

合肥麟美生物科技有限公司

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m6A(N6-methyladenosine,6-甲基腺嘌呤)是真核生物mRNA中常见的一种转录后修饰。m6A主要富集在mRNA的启动子区、终止密码子区附近。作为一种可逆化修饰,RNA既可以在甲基化转移酶的作用下发生m6A甲基化修饰,又可以在FTO、ALKBH5等酶的作用下发生去甲基化修饰。m6A甲基化修饰被证明是可逆的,由甲基化转移酶 (Writers)、去甲基化酶 (Erasers)和甲基化阅读蛋白(Readers)等共同参与。

已知mRNA 5’ UTR处的甲基化修饰,作用包括维持mRNA稳定性、mRNA前体剪切、多腺苷酸化、mRNA运输与翻译起始等。而3’ UTR 发生的修饰有助于出核转运、翻译起始,以及与polyA结合蛋白一起维持mRNA的结构稳定。另外RNA甲基化阅读蛋白还能识别miRNA初级体上的m6A修饰,有助于miRNA成熟体的加工。一旦参与m6A修饰的酶出现异常会引起一系列疾病,包括肿瘤、神经性疾病、胚胎发育迟缓等。

目前,对于目标基因的m6A修饰的主流检测技术是MeRIP-pcr(m6A-pcr),该技术使用N6-甲基腺嘌呤抗体富集高甲基化的RNA片段,后进行反转录pcr验证。

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