干货 | 限制性内切酶知多少？
何谓限制性内切酶？
限制性内切酶是一种能够识别双链DNA分子中特定核苷酸序列，并在特定位置切割DNA链中的磷酸二酯键的一类酶，简称限制酶。
▲ BamHI、KpnI、EcoRV酶切示意图
限制性内切酶的命名规则
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缩写 |
全名 |
含义 |
|
B |
Bacillus |
属名第一个字母 |
|
st |
stearothermophilus |
种名前两个字母 |
|
E |
ET |
株系名第一个字母 |
|
II |
第二个发现 |
在此类细菌中发现的顺序 |
限制性内切酶的分类
根据结构的复杂程度、作用方式与辅因子的区别，限制性内切酶可分为四大类，以下内容总结了各类的特点和典型酶种：
Type Ⅰ
• 特点：
2.能够识别DNA特定序列，切割位点距离识别位点不定，可达数千个碱基之远；
3.作用时需要ATP。
• 典型酶种：EcoB、Ecok等
Type Ⅱ
• 特点：
2.识别序列多为短的回文序列（一般为4-8bp），酶切位点通常就是所识别序列，特异性切割；
3.作用时需要Mg2+；
• 典型酶种：HindII、NotI等
Type Ⅲ
• 特点：
2.切割位点大约距离识别位点24-26bp；
3.作用时需要ATP。
• 典型酶种：Hinflll等
Type Ⅳ
• 特点：
1.仅切割被甲基化修饰了的DNA序列；
2.切割位点距离识别位点 30 bp左右。
• 典型酶种：MrcA、McrBC等
除了以上分类，根据识别和切割位点的异同可以分为3类，如下表所示：
|
内切酶类别 |
特点 |
典型酶种 |
|
Type I |
1、同时具有识别切割和修饰活性； 2、能够识别DNA特定序列，切割位点距离识别位点不定，可达数千个碱基之远； 3、作用时需要ATP。 |
EcoB、EcoK等 |
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Type II |
1、只具有识别切割的作用； 2、识别序列多为短的回文序列（一般为4-8bp），酶切位点通常就是所识别序列，特异性切割； 3、作用时需要Mg2+； 4、分子克隆中最常用的一类限制酶。 |
HindIII，NotI等 |
|
Type III |
1、同时具有识别切割和修饰活性； 2、切割位点大约距离识别位点24-26bp； 3、作用时需要ATP。 |
HinfIII等 |
|
Type IV |
1、仅切割被甲基化修饰了的DNA序列； 2、切割位点大约距离识别位点 30 bp左右。 |
McrA，McrBC等 |
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