血清在培养过程中出现“小黑点”是怎么回事

　牛血清在培养基中扮演着这么多的角色，那么它在培养的过程中也会出现一些的问题，比如说：在培养过程中会出现一个个“小黑点”的现象，这是怎么一回事呢？

     我们一旦发现培养基中有黑点，我们先不要着急，也不要惊慌，要搞清楚这个黑点是什么？什么形成的？

首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动等。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点出现前相比，没有任何变化，那么，黑点的出现可能与以下几种情况有关：

首先可能是细胞生长过老，破碎的细胞残骸；再有可能就是血清质量不好，反复冻融的结果；然后可能是配制培养基的pH值偏高，不宜细胞生长；其次可能是亦有可能是配制培养基的水质、容器不合格（可应用离心、过滤的方法去除这些黑点）；最后可能是培养的原代细胞中出现小黑点（可能是原代组织中的杂质，多次传代可以消除）。

　　那么我们如何防止黑点生成呢？通过我们多年的从业经验，郑州德宁生物认为至少要做到以下几点：

（1）尽可能地减少血清冻融次数；   

（2）培养基无需37℃水浴；

（3）培养基保持最佳PH值7.0- 7.2；   

（4）严格控制配制培养基的水质，容器定期刷洗；   

（5）掌握细胞传代的最佳时机，细胞切勿生长过老