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  • 武汉瀚海新酶生物科技有限公司 |
  • 公司地址:湖北省武汉市洪山区洪山区东湖新技术开发区高新大道666号武汉国家生物产业(九峰创新)基地B5栋
13041422590转0189
一司一品
热启动 Taq DNA 聚合酶 (化学修饰)

Taq DNA 聚合酶,是一种耐热的 DNA 聚 合酶,来源于水生栖热菌(Thermus aquaticus YT-1),该酶具有 5’→ 3’的聚合酶活性和双链 特异性 5’→ 3’的核酸外切酶活性。热启动 Taq DNA 聚合酶是在其基础上通过化学修饰而获 得。该酶通过化学修饰封闭低温以及室温的酶 活,经过 95℃热激活后,化学修饰基团水解 脱落释放酶活。从扩增体系配制到 PCR 扩增前,不会产生由于引物错误配对而形成的非特 异性扩增,最大程度降低非特异扩增和引物二 聚体的形成,提高扩增的灵敏度和特异性。 运输与保存方法:≤0℃运输;-20℃保存。 单位定义:使用活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模 板/引物,74℃,30 min 内,摄入 10 nmol 的 全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为 1 个活 性单位(U)。 质量控制:核酸内切酶残留检测:10 U 的本酶和 4 μg pUC19 DNA 在 37 ℃下孵育 4 h,DNA 的电泳 谱带不发生变化。 5 kb λDNA扩增检测: PCR体系中加入1.25 U 本酶,200 μM dNTP,以 5 ng λDNA 为模板扩 增 25 个循环后,琼脂糖凝胶电泳,可见有单一的特异性 5 kb 条带。 核酸外切酶检测:50 μL 反应体系中加入 12.5 U 本酶,1 μM 5’- FAM 标记的寡核苷酸,37 ℃孵育 30 min 无降解信号。 RNase 残留检测:10 U 的本酶和 0.8 μg MS2 RNA 在 37℃下孵育 2 h,RNA 电泳谱带不发 生变化。 热失活:无

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企业核心
  • RNase 抑制剂(基因重组型)
  • 本产品是在GMP标准下生产的由大肠杆菌重组表达的鼠源RNA抑制剂(RNase Inhibitor (Recombinant))。

    此品与RNase结合形成复合体,以抑制RNase活性并保护目标RNA不被降解。

     

    产品组分:

    货号

    组分

    储存温度(℃)

    产品编号/规格

    EN-1005S   (20KU)

    EN-1005L   (200KU)

    EN-1005-I

    RNase   Inhibitor (Recombinant)

    (40   U/μL)

    -20

    0.5mL

    5mL

     

    产品性质:

    活性定义单位:  一个单位指限制50%RNase A活性所需酶量

    (RNase A活性通过抑制其水解cytidine 2′, 3′-cyclic monophosphate测定)

     

    质量控制:

    纯度≥95%,宿主DNA残留≤100pg/mg,宿主蛋白残留≤50ppm,内毒素残留≤0.05EU/1000U,

    无RNA酶、内切酶、外切酶残留,无菌,无支原体

     

    产品特点:

    高效抑制RNaseA,RNase B,RNase C活性,无核酸酶污染,无菌源 DNA 残留。提升所有RNA实验

    产物产量,提升IVT产物mRNA完整性,适用于几乎所有对RNA完整性敏感的实验。

  • 2'-脱氧尿苷 -5'-三磷酸三 钠
  • 本品为无色液体溶液。适合用于 PCR 扩增、real-time PCR、cDNA 或普通 DNA 合成, DNA 测序和标记等各种常规分子生物学实 验。可用超纯水稀释,并用高纯度 NaOH 溶液调节 pH 值至 7.0,纯度≥99%(HPLC)。 经检测,不含 DNase、RNase、phosphatase。 可以直接用于 PCR 等各种常规分子生物学反 应。

    运输与保存方法

    冰袋运输,-20 ℃保存。避免反复冻融,产品 有效期 2 年。

  • T4 UvsY 蛋白
  • T4 UvsY 蛋白是一种噬菌体 T4 重组调节蛋白,在 UvsX 执行同源重组过程中起到促进作用。在 UvsX 寻找同源序列时,它需与预结合在单链 DNA 上的单链 DNA 结合蛋白竞争结合位点,而 UvsY 蛋白促进这种竞争,有助于 UvsX与单链 DNA 的结合。它可增强 UvsX 蛋白的依赖 DNA 的 ATPase 的活性,降低其发挥活性所需的最低浓度,从而促进链置换。UvsY促进 UvsX 重组酶侵入 ssDNA-单链结合蛋白复合物,导致单链结合蛋白的释放,从而 UvsX与单链 DNA 的结合。

    运输与保存方法

    -20℃储存,有效期 1 年(避免反复冻融)。

    蛋白浓度

    通过 280 nm 处的紫外吸收测定蛋白浓度为1mg/ml±5%。

    储存液冲液

    20 mM Tris-HCl, 0.5 M NaCl, pH 8.0, 50%glycerol

    热失活

    60℃,10min

    质量控制

    核酸外切酶残留检测:1μg 的本品和 1 μgλ-Hind III digest DNA 在 37℃下反应 16 小时,DNA 的电泳谱带不发生变化;

    核酸内切酶残留检测:1 μg 的本品和 1 μgλDNA 在 37℃下反应 16 小时,DNA 的电泳谱带不发生变化;

    切口酶残留检测:1 μg 的本品和 1 μg pBR322在 37℃下反应 16 小时,DNA 的电泳谱带不发生变化;

    RNase 活性:1 μg 的本品和 1.6 μg MS2 RNA在 37℃下反应 16 小时,DNA 的电泳谱带不发生变化;

    大肠杆菌 DNA 残留检测:1 μg 本品中残留的核酸经 E.coli 16s rDNA 特异性的 TaqManqPCR 检测,E.coli 基因组残留≤1 拷贝。

    特征与应用

    • DNA等温扩增
    • RPA扩增
    • 基因检测
  • M-MLV 逆转录酶 (RNaseH-)
  • M-MLV 逆转录酶来源于莫罗尼鼠白血病病毒(Moloney Murine Leukemia Virus),是一种依赖 RNA 的 DNA 聚合酶,缺少 3′ →5′ 的核酸外切酶活性,通过突变去除了 RNaseH 活性。该酶可利用 RNA(cDNA 合成)或ssDNA 作为模板,合成一条互补的 DNA 链,可应用于第一链 cDNA 合成、第二链 cDNA合成、RNA 引物延伸、RT-PCR、RT-qPCR 和cDNA 文库构建等。

    组分 HMD3301S
    10 x MMLV Buffer 500 μL
    M-MLV 逆转录酶 (RNaseH-) (200 U/μL 100 μL
     

    运输与保存方法

    ≤0℃运输;-20℃保存。

    单位定义

    以 Poly (rA)·Oligo (dT)为模板/引物,在 37℃,10 min 条件下,掺入 1 nmol 的 dTTP 为酸不溶性物质所需要酶量定义为 1 个活性单位(U)。

    质量控制

    • 核酸内切酶残留检测:400 U 本酶和 4 μgpUC19 DNA 在 37℃下孵 育 4 h,DNA 的电泳 谱带不发生变化。
    • 核酸外切酶检测:50 μl 反应体系中加入 500 U 本酶,1 μM 5’- FAM 标记的寡核苷酸,37℃ 孵育 30 min 无降解信号。
    • RNase 残留检测:400 U 的本酶和 0.8 μg MS2 RNA 在 37℃下孵育 1 h,RNA 电泳谱带不发生变化。
    组分 体积
    Template RNA optional
    Oligo(dT)23(50 μM)or Random Primer Mix(60 μM) 2 μL
    dNTP Mix (10 mM each 1 μL
    RNase Inhibitor(40 U/μL) 0.2 μL
    M-MLV Reverse Transcriptase (200 U/μL) 1 μL
    10 x MMLV Buffer 2 μL
    Nuclease-free Wate Up to 20 μL

     

    Total RNA 1ng - 1μg
    Poly(A) RNA 50 pg - 100 ng

     

    温度 时间
    25℃ⓐ 10 min
    42℃-55℃ⓑ 1 hⓑ
    95℃ 5 min
     

    ⓐ如使用 Random Primer Mix 增加该孵育步 骤

    ⓑ如使用特异性的目的基因引物调整本步骤 温度为 42-55 ℃

    ⓒ可在 30-120 min 间调整。延长逆转录时间 有助于获得更长的 cDNA (>5 kb)

  • BstL DNA 聚合酶
  • BstL DNA 聚 合 酶 是 在 野 生 型 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶 I 大片段(BstDNA 聚合酶大片段)的基础上,通过定向进化、理性设计、半理性设计等多轮分子改造进化而来,相比于野生型 Bst DNA 聚合酶大片段,BstL DNA 聚合酶显著提升了扩增速度、产量、耐盐性和热稳定性等性能。BstL DNA 聚合酶具有 5´→3´ 的聚合酶活性和强链置换活性,但没有 5´→3´ 核酸外切酶活性。使用本产品能够大幅度提升环介导等温扩增(LAMP)体系的性能。

    注:BstL DNA 聚合酶的贮存液为:10 mMTris-HC(lpH 7.1), 50 mM KCl, 0.1 mM EDTA,1 mM DTT, 0.1% Triton X-100, 50%甘油。

    产品组分

    常规浓度

    组分 HMD7002S HMD7002M
    BstL DNA 聚合酶 (8 U/μL) 100 μL 1000 μL
    10×HH BstL Buffer 2.0 mL 2×2 mL
    MgSO4 (100 mM) 1.5 mL 2×1.5 mL

    高浓度:

    组分 HMD7002D
    高浓度 BstL DNA 聚合酶(240 U/μL) 25 μL
    10×HH BstL Buffer 1×5 mL
    MgSO4(100 mM) 2×1.5 mL
    BstL Dilute Buffer(Glycerol free) 1 mL
     

    应用

    1)用于 LAMP 等温扩增体系检测靶标 DNA;

    2)与瀚海 RTL 逆转录酶产品联合使用,进行RT-LAMP 等温扩增检测靶标 RNA。

    运输与保存方法

    0 ℃以下运输,-20 ℃保存。避免反复冻融,产品有效期 18 个月。

    活力定义

    65 ℃, 30 min 内使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量,定义为 1 个活性单位 (U) 。

    质量控制

    核酸内切酶残留检测:基于 HH BstL 反应缓冲液配制 50 µL 反应体系,其中包含 1 µg 的pUC19 DNA 和 500 U 本酶 ,在 37 ℃下孵育4 小时,由琼脂糖凝胶电泳检测,pUC19 DNA电泳条带没有明显变化。

    核酸外切酶残留检测:基于 HH BstL 反应缓冲液配制 50 µL 反应体系,其中包含 1 µg 的 Lambda-HindIII DNA 和 500 U 的本酶,在 37 ℃下孵育 4 小时,由琼脂糖凝胶电泳检测,电泳条带没有明显变化。

    RNase 残留检测:基于 HH BstL 反应缓冲液配 制 10 µL 反应体系,其中包含 40 ng 的 MS2 RNA (3500 nt) 和 8 U 本酶 ,在 37 ℃下孵育 16 小时,由琼脂糖凝胶电泳检测,电泳条带 没有明显变化。

    大肠杆菌 DNA 残留检测:120 U 本酶中残留 的核酸经E.coli gDNA特异性的TaqMan qPCR 检测,E.coli 基因组残留低于 1 拷贝。

    实验流程

    1)将 10×HH BstL Buffer 取出,冰上解冻,使 用前涡旋 10 s 混匀,并短暂离心。

    2)除模板 DNA 外,其余组分按下表顺序配 制反应混合液。

    物质名称 体积 终浓度
    10×HH BstL Buffer 2.5 μL 1× (含有 2 mM 镁离子)
    MgSO4 (100 mM) 1.5 μL 6 mM (总共 8 mM)
    dNTP Mix (10 mM each) 3.5 μL 1.4 mM
    FIP/BIP Primers (25×) 1 μL 1.6 μM
    F3/B3 Primers (25×) 1 μL 0.2 μM
    LoopF/LoopB Primers (25×) 1 μL 0.4 μM
    BstL DNA 聚合酶 (8 U/μL) 1 μL 320 U/mL
    模板 DNA x μL >10 拷贝
    Nuclease-free Water up to 25 μL -
     

    3)用移液器吹打混匀,并短暂离心。

    4)60-65 °C 恒温孵育 1 h,观察扩增产物。

  • Bsu DNA 聚合酶(大片段)
  • Bsu DNA 聚 合 酶 , 大 片 段 ( Bsu DNA Polymerase, Large Fragment)由克隆有来自 Bacillus subtilis DNA 聚合酶 I 基因的重组E. coli 菌株表达并经过多步纯化精制得到。该酶保留了 Bacillus subtilis DNA 聚合酶 I 的 5´→3´ 聚合酶活性,但是缺失了 5´→3´ 核酸外切酶结构域(截去了 Bacillus subtilis DNA 聚合酶 (Bsu) I 基因的前 296 个 AA,因而缺失了 5´→3´ 核酸外切酶结构域),同时该大片段自身缺乏 3´→5´ 核酸外切酶活性。

    产品组分

    组分 200U 1000U
    Bsu DNA 聚合酶,大片段(5 U/μL) 40μL 200μL
    10×Bsu Reaction Buffer 1mL 1mL
     

    运输与保存方法

    -20℃储存,有效期 1 年(避免反复冻融)。

    储存缓冲液

    25 mM Tris-HCl (pH 7.4), 50 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM dithiothreitol and 50% glycerol.

    活性定义

    在 37 ℃条件下,30 min 内使 10 nmol 的 dNTP 掺入到酸性不溶物所需要的酶量定义 为 1 个活性单位(U)。

    热失活

    75 ℃,20 min

    质量控制

    核酸外切酶残留检测:50 U 的本品和 1 μg λ-Hind III digest DNA 在 37℃下反应 4 小时,DNA 的电泳谱带不发生变化;

    核酸内切酶残留检测:50 U 的本品和 1 μg λDNA 在 37℃下反应 4 小时,DNA 的电泳谱

    带不发生变化;

    切口酶残留检测:50 U 的本品和 1 μg pBR322 在 37℃下反应 16 小时,DNA 的电泳谱带不 发生变化;

    RNase 活性:50 U 的本品和 1.6 μg MS2 RNA 在 37℃下反应 16 小时,DNA 的电泳谱带不 发生变化;

    大肠杆菌 DNA 残留检测:5 U 本品中残留的 核 酸 经 E.coli 16s rDNA 特 异 性 的 TaqMan qPCR 检测,E.coli 基因组残留≤1 拷贝。

    反应条件

    1X Bsu Reaction Buffer

    10 mM Tris-HCl (pH 7.9 @ 25°C)

    50 mM NaCl

    10 mM MgCl2

    1 mM DTT

    应用

    • 随机引物法标记
    • cDNA 第二条链的合成
    • 单个 dA 的加尾
    • 链置换的 DNA 合成
  • T4 UvsX 重组酶
  • T4 UvsX 重 组 酶 来 源 于 T4 噬 菌 体 , 是RecA/Rad51 家族的同源体,在双链 DNA 断裂的修复和复制叉重新启动的过程中起到重要作用。T4 UvsX 重组酶可与其他重组酶一起锚定在单链 DNA 上,并激活其在其他双链DNA 上寻找同源序列,以进一步完成链置换。

    运输与保存方法

    -20℃储存,有效期 1 年(避免反复冻融)。

    蛋白浓度

    通过 280 nm 处的紫外吸收测定蛋白浓度为2mg/ml±5%

    储存液冲液

    20 mM Tris-HCl, 0.5 M NaCl, pH 8.0, 50%glycerol

    热失活

    60℃,10min

    质量控制

    核酸外切酶残留检测:2 μg 的本品和 1 μgλ-Hind III digest DNA 在 37℃下反应 16 小时,DNA 的电泳谱带不发生变化;

    核酸内切酶残留检测:2 μg 的本品和 1 μgλDNA 在 37℃下反应 16 小时,DNA 的电泳谱带不发生变化;

    切口酶残留检测:2μg 的本品和 1 μg pBR322在 37℃下反应 16 小时,DNA 的电泳谱带不发生变化;

    RNase 活性:2 μg 的本品和 1.6 μg MS2 RNA在 37℃下反应 16 小时,DNA 的电泳谱带不发生变化;

    大肠杆菌 DNA 残留检测:2 μg 本品中残留的核酸经 E.coli 16s rDNA 特异性的 TaqManqPCR 检测,E.coli 基因组残留≤1 拷贝。

    反应条件

    1× UvsX Reaction Buffer20 mM Tris-acetate, pH 7.8100 mM Potassium acetate10 mM Magnesium acetate1 mM DTT

    应用

    • DNA 等温扩增
    • RPA 扩增
    • 基因检测
  • T4 RNA 连接酶
  • 本产品是由大肠杆菌重组表达的 ATP 依赖性T4 RNA 连接酶(T4 RNALigase I)。此酶可催化寡核苷酸、单链 RNA 以及 DNA 分子间/内5’-PO4 和 3’-OH 形成磷酸二酯键。

    产品组分

    组分 不同规格各组分体积
    T4 RNA 连接酶(10 U/μL) 1KU 5KU
    100ul 0.5ml
    10xReaction Buffer 1.5ml 7.5ml
    Adenosine-5'-Triphosphate (ATP10 mM) 200ul 1ml
    PEG 8000 1 ml 5 ml
     

    产品储存

    -20℃储存(避免反复冻融)。

    储存缓冲液

    50 mM KCl, 10 mM Tris-HCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50 % Glycerol, (pH 7.4 @ 25°C)

    活性定义

    活性定义单位:一个单位指在 37℃条件下,30分钟内将 1nmol 的 5’-[32P]rA16 转化为抗磷酸形态所需要的酶量。

    质量控制

    纯度≥95%,宿主 DNA 残留≤100 pg/mg, 宿主蛋白残留≤50 ppm,内毒素残留≤10 EU/mg,无 RNA 酶、核酸内切酶、核酸外切酶、蛋白酶残留,无菌,无支原体。

    反应体系和条件

    单链 RNA 分子间连接反应

    1.根据如下表格配制反应体系:

    组分 体积
    无核酸酶水 Up to 20 μl
    ss RNA (20 μM) 0.5 μl
    10 × Reaction Buffer 2 μl
    ATP(10 mM) 1 μl
    PEG 8000 8 μl
    T4 RNA Ligase 1 μl
     

    2. 混匀后,37℃孵育 30 分钟;
    3. 65℃孵育 15min,可终止反应。

企业介绍
武汉瀚海新酶生物科技有限公司

瀚海新酶的愿景: 成为世界一流的特种酶产品与服务提供商 企业简介: 瀚海新酶生物科技有限公司成立于 2015 年,是一家专 业从事生物医药、体外诊断核心原 料研发、生产、应用和技术服务的高新技术企业。在上海、武汉、苏州、青岛、宜昌等五地分别设立研发生产中心。 公司拥有酶基因挖掘与性能表征、酶分子优化与改造,酶 基因高通量筛选、有机合成、合成生物学、抗原抗体研发制备等技术平台;基于以上技术平台开发出数百种生物医药、 疫 苗生产、体外诊断相关原材料。 公司建有超大生产规模、超高设备标准的医药级特种酶生产体系。 已向超过 100 家国内生物医药、疫苗制备、体外诊断试剂生产商提供产品与服务 ; 同时产品出口到海外 25 个国家与地区。 公司将不断拓展产品领域,丰富产品品种,为把瀚海新酶 打造成“世界一流的特种酶产品与服务的供应商”而不懈奋斗 ! 发展历程: 2015.01公司成立,产品涵盖体外诊断原料,绿色生物催化用酶,分子生物学用酶及相关的技术服务 2015.06瀚海诊断试剂研发平台通过验收 2016.01乳酸脱氢酶等4个项目研发完成 2016.06胆固醇氧化酶等6个项目攻关研发完成 2016.08糖化血红蛋白等6个项目完成中试 2017.03产品大规模进入终端客户试用,参加了规模庞大的青岛检验医学博览会(CACLP) 2017.08通过ISO9001:2015质量管理体系认证 2017.12重点产品糖化白蛋白试剂(GA)定制服务,化学发光产品APS-5上线 2018.02瀚海新酶获preA轮融资1500万,估值13000万 2018.03携原料与试剂定制两条线的产品亮相重庆CACLP,并荣获青年企业家创业项目路演“最具投资价值奖” 2018.06武汉光谷生产基地落成,瀚海2018年股东会顺利召开,公司发展再上新台阶 2018.09荣获光谷“瞪羚企业”称号 2018.11认定为高新技术企业 2018.12荣获“武汉市科技局科技小巨人”称号 2019.03获得知识产权贯标认证 2019.04获得A轮融资4400万元 2019.08获得招才局颁发的《3551最具投资价值企业奖》 2019.09连续两年荣获光谷瞪羚企业 2020.04应对新冠疫情,抗疫攻坚,研发关键原材料助力一线抗疫 2020.05承担国家级项目“科技助力2020”重点专项 2020.08重装亮相南昌CACLP展会 2020.09与糖智药业达成战略合作 2020.10参与筹备和组建体外诊断上游原材料协会,第一届中国体外诊断关键原材料及零部件论坛(CISCE)

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