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  • 上海睿远生物医药科技有限公司 |
  • 公司地址:上海市上海市浦东新区中国(上海)自由贸易试验区康桥东路518号8号楼4009室
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一司一品
Ome-01 外泌体纯化试剂盒(Magnetic Beads)

一、产品简介。 本产品是一款以Magnetic Beads 为分离材料的外泌体纯化试剂盒。在特定的缓冲体系中,Magnetic Beads 可吸附外泌体,并被洗脱液(PBS或ddH2O)洗脱下来,从而完成外泌体的分离与纯化。同时,利用PBS或ddH2O洗脱后的外泌体不含其它化合物,可直接用于细胞培养实验和动物体内注射。 二。特点与优势。 1. 本试剂纯化效率高,外泌体回收率达到95%以上。 2. 本试剂盒纯化的外泌体纯度高,杂蛋白含量在5%以内。 3. 本试剂盒操作简单,能够快速(2 h)完成外泌体纯化。 4. 本试剂盒操作温和,纯化的外泌体完整性好。 5. 本试剂盒纯化的外泌体不含其它化合物,可直接用于细胞培养实验和动物体内注射实验。

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企业核心
  • 动物模型构建
  • 模式动物服务

    关键词:实验动物模型公司  动物实验外包  动物实验课题外包  动物模型构建公司  动物模型制作公司  第三方检测机构
     
    公司与具有动物使用资质的单位合作,可承接包括大鼠、小鼠、兔子,裸鼠等相关实验;动物合作平台常规手术仪器、设备齐全,可开展动物放疗、mic-CT、MRI、活体成像等特色动物实验
     
     
     承接过的部分动物模型
     
    消化系统 胃溃疡模型
    大鼠胃炎模型
    新生鼠坏死性结肠炎模型

     

     

    肝纤维化模型
    急性肝损伤模型
    肝硬化模型
    大鼠急性肝损伤模型
    肝切除模型
    肝缺血再灌注模型
    肝纤维化模型
      肝部分切除模型;
    呼吸系统 OVA哮喘模型
    慢性肺阻塞模型
    慢性阻塞性肺模型
    肺纤维化模型
    急性肺炎模型
    窘迫呼吸症模型
    泌尿生殖系统 肾纤维化模型
    嘌呤霉素诱导的肾病模型
    急性肾衰竭模型
    尿毒症模型
    单侧肾切除模型
    大鼠子宫内膜异位症模型
    卵巢早衰模型
    肾小管坏死小鼠模型
    心血管系统 小鼠动脉粥样硬化模型
    动脉钙化模型
    脑卒中模型(脑缺血再灌注模型)
    心肌缺血模型
    蛛网膜下腔出血模型
    脑出血模型
    肺动脉高压模型
    股动脉血管炎模型
    失血性贫血动物模型
     
    神经系统 抑郁模型
    帕金森模型
    尼古丁戒断模型
    睡眠剥夺模型
    大鼠癫痫模型
    阿尔兹海莫(AD)症模型
    大(小)鼠水迷宫实验
    内分泌系统 糖尿病模型(Ⅰ、Ⅱ糖尿病)
    卵巢早衰模型、
    多囊卵巢模型
    大鼠甲状腺功能亢进症
    免疫疾病 小鼠关节炎模型(CIA)
    桥本甲状腺炎模型(HT)
    多样硬化模型(EAE)
    裸鼠成瘤模型 裸鼠皮下成瘤模型
    肾原位癌模型
    肝原位癌模型
    胃原位癌模型
    肠原位癌模型
    膀胱原位癌模型
    肺原位癌模型
    其他模型 骨质疏松模型
    股骨头坏死模型
    骨性关节炎模型
  • 全基因敲除
  • 技术简介

     

    根据基因的结构特征,选择整个基因,基因组序列作为敲除区域,在基因的5'和3’UTR区域设计相应的sgRNA,同时构建含与敲除基因5'和3’临近区域同源的Donor质粒,将Cas9,两条对应的sgRNA和Donor共转染目的细胞,通过sgRNA引导Cas9核酸酶对目的基因靶位点进行切割,引起DNA双链断裂(Double-strand  breaks,DSB),通过细胞自身的同源重组修复(Homology-directed  repair,HDR)途径,将Donor质粒重组到目的细胞的基因组中,造成目的基因在基因组序列上的完全敲除,达到基因的完全敲除的效果

     

    应用范围

     

     

    1 2 3
    基因敲除更彻底,用于基因功能研究,抗体验证等实验时更有说服力 适用于存在多个转录本的编码基因的敲除 适用于非编码基因的敲除

    方案选择

     

     

    1 2 3
    拥有质粒瞬转和慢病毒感染两种递送方式,可实现大多数细胞系和干细胞的基因编辑 拥有多种荧光筛选标记,结合流式分选,可提高获得阳性目的细胞的概率 在细胞不产生耐药的情况下,可提供多种药筛标签,满足不同实验需求。

    应用案例

     

    细胞名称:Thp-1

    基因名称:MIR3945HG

    项目方案:构建Cas9/sgRNA过表达质粒和含Donor片段的过表达质粒,转染Thp-1细胞,再通过流式分选对GFP和mCherry阳性的细胞进行筛选,挑单克隆经鉴定后进行扩增,得到MIR3945HG全基因敲除的单克隆细胞株。

    阳性细胞鉴定:通过对流式分筛选出的单克隆细胞进行PCR及测序鉴定,MIR3945HG基因整个转录本缺失,MIR3945HG基因在功能上到达完全敲除的效果。

     

     

    项目流程与周期

    交付标准

     

    1 2 3
    按指定方案构建的目的基因编辑细胞株,每个目的细胞株交付基因型正确的2个克隆,每个克隆2支冻存细胞(1×10⑹cells/支) 对照细胞株,瞬转方案为对应野生型细胞,慢病毒方案为Cas9稳转细胞 项目报告及质检报告

     

     

     

  • 定点突变细胞
  •         点突变是指基因序列中单个核苷酸碱基的改变。突变发生的位置对基因功能的影响大小不一。对非编码基因而言,大多数点突变没有什么影响;当突变位点位于基因启动子序列中时,则可能影响基因的表达;当发生在内含子剪接位点时,则可能会干扰RNA的正确剪接;当发生读码框内时,可能仅仅引起一个氨基酸的改变而改变整个蛋白的结构和功能。

            从进化论的角度看,点突变既可能是有益的也可能是有害的。有益的突变使个体产生优势,并将该特性传给后代,从而使整个种群得到改善;有害突变会导致个体死亡,或通过自然选择的方式使其繁殖能力大大降低从而被淘汰。而大多数情况下我们更关注因点突变引起的疾病,如遗传性疾病镰刀性贫血症以及各种肿瘤。

          通过构建点突变细胞株,可以进行单核苷酸多态性、遗传性疾病、肿瘤等的研究,也能用于靶向药、基因疗法的开发。基于大量项目的经验,睿远能够提供同源重组、单碱基编辑、先导编辑等多种技术,能够实现几乎所有位点基因突变细胞株的构建。

    技术简介

    同源重组技术

          利用CRISPR/cas9技术,设计并构建cas9/sgRNA和含目的基因点突变的供体载体(Donor),将CAS9/sgRNA和Donor质粒共转染目的细胞,通过sgRNA引导Cas9核酸酶对目的基因位点进行切割,引起DNA双链断裂(Double  strand  breaks    DSB),细胞以Donor作为模板进行同源重组修复(HDR),将目标点突变重组到基因组靶位点,从而获得目的基因点突变的细胞系。

     

    Base  editing  技术

            单碱基编辑技术是一种基于核酸酶失活的CAS9(dcas9)或cas9切口酶(cas9n)、胞嘧啶脱氨酶(APOBEC1)或腺嘌呤脱氨酶(TadA)以及sgRNA形成的复合体,在不断裂DNA双链的情况下,利用sgRNA将复合体靶向与sgRNA互补配对的基因组靶位点,对靶向位点进行精准编辑,实现在活性窗口内C-T、G-A、A-G,T-C的单碱基转换

    Prime   editing技术

     

        Prime  editing(PE)系统是在原有的CRISPR/CAS9体系基础上进行改造开发出来的基因编辑系统,该系统包括2个元件:pegRNA(prime  editing  guide  RNA)和nCas9(H840A)-M-MLV逆转录酶的融合蛋白。psgRNA是一段改造后的sgRNA,它在传统sgRNA的3‘末端增加了一段RNA序列。pegRNA由3个部分组成,包括Single-guide  RNA(sgRNA)、引物结合位点(Prime  Binding  site)PBS和储存有靶向位点编辑信息的逆转录模板(RT-template)。在pegRNA的引导下,融合蛋白会靶向sgRNA互补配对的基因组靶位点,并对含PAM的靶DNA链进行切割(pegRNA的非互补链)。随后,PBS序列与被切割的目标DNA链互补配对,逆转录产物(DNA)包含我们所需要的突变位点。这段逆转录DNA会入侵并进入基因组DNA发生整合,细胞利用体内修复机制对整合DNA切口进行修复,使所需要的突变位点整合到基因组靶位点,从而获得目的基因点突变的细胞系。

     

    应用范围

    1 2 3
    可用于单基因多态性及单碱基突变引起的疾病的研究 可用于靶向药、基因疗法等的开发 可通过引入终止密码子实现基因敲除,尤其是当目的基因存在重合基因时

    方案选择

    1 2 3
    同源重组只能选择瞬转方案,单碱基编辑和先导编辑可选择瞬转或者慢病毒方案 拥有多种荧光筛选标记,结合流式分选,可提高获得阳性目的细胞的概率 在细胞不产生耐药的情况下,可提供多种药筛标签,满足不同实验需求

    应用案例

    细胞名称:Hep  G2

    基因名称:CYP3A5

    项目方案:根据CYP3A5基因突变位点序列设计sgRNA,利用CRISPR/CAS9对目的位点进行切割,引起DNA双链断裂,通过同源重组的方式将含有突变位点rs776746(A>G)的目的片段引入指定位点,通过GFP标签筛选出CYP3A5的单克隆细胞。

        阳性细胞鉴定:通过对流式分选筛选出的单克隆细胞进行PCR及测序鉴定,CYP3A5基因rs776746位点A成功突变为G

     

    项目流程与周期

    交付标准

    1 2 3
    按指定方案构建的目的基因编辑细胞株,每个目的细胞株交付基因型正确的2个克隆,每个克隆2支冻存细胞 对照细胞株,瞬转方案为对应野生型细胞,慢病毒方案为CAS9稳转细胞 项目报告及质检报告

     

     

  • 番红O-固绿染色
  • 产品简介:

    番红固绿染色可以很好的显示软骨各层和潮线结构,因其可以直观反映关节软骨、软骨下骨和骨组织的结构而备受青睐,是一种常规的研究软骨染色的方法。本公司生产的番红固绿染色液显示软骨基质呈均匀的红色,成骨呈绿色,软骨组织与骨组织分对比鲜明。

    保存条件:

      常温保存,有效期12个月。

      使用方法:

      1.石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。

      2.固绿染色:切片入骨组织固绿染色液1-5min,水洗去多余染液,至软骨呈无色,苏木素分化液(G1039)稍浸泡10s,自来水稍洗。

      3.番红染色:切片入骨组织番红染色液1-5s,四缸无水乙醇快速脱水分别5s、2s、10s、第四缸镜检。

      4.透明封片:干净的二甲苯透明5min,中性树胶封片。

      5.显微镜镜检,图像采集分析。

      染色结果:

      软骨呈鲜红色,成骨呈绿色。有些结缔组织也呈红色。

      注意事项:

      1.片子染色不好需要重新染色时,可以用自来水浸泡去除固绿颜色,苏木素分化液(G1039)浸泡去除番红颜色,将颜色全部脱色后方可重新染色。

      2.染色时间稍有差异红色和绿色的差异就会很大,要注意镜下控制两种颜色的程度。自来水中能分化固绿的颜色,刚染完固绿的片子软骨部位也会着上比较深的绿色,这时就需要在自来水中分化至软骨部分的绿色变浅或者变成无色。但是同时也要注意成骨部分的绿色颜色变化,如果成骨部分的颜色在分化时过浅就需要重新染固绿,再用自来水分化直至达到软骨部分绿色比较浅或者无色,成骨部分绿色较深。

      3.番红染次数多了会产生沉淀且不易着色,需及时更换染液。

     

     

  • 油红O染色
  • 服务介绍:

      油红O对脂滴的染色机制一般认为是物理学上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂质染色,即油红O先溶于60%异丙醇中,然后切片浸入油红O染液中时,油红O在组织脂质的溶解度较60%异丙醇中的溶解度高,所以在染色时油红O从60%异丙醇中转移入脂质中使脂滴显示红色

     实验流程:

      冰冻切片晾干-油红染色-分化-苏木素染色-分化-返蓝-甘油明胶封片-显微镜镜检。

    结果判读:

      脂滴橙红色至鲜红色,细胞核浅蓝色

     送样运输要求:

    1、样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,常温运输送样。

    切勿固定时间过长,切勿冷冻结冰;

    2、新鲜组织干冰运输。

    3、冰冻切片-20℃运输。

     

     

  • HE染色
  • 服务介绍:

      苏木精-伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

     实验流程:

      脱蜡至水-苏木素染色-伊红染色-脱水封片-显微镜镜检

     

    送样运输要求:

      样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,常温运输送样。

      切勿固定时间过长,切勿冷冻结冰。

     

     

     

  • 蛋白质免疫检测Western blot
  • Western blot 实验简介

      是指通过SDS-PAGE 胶将不同分子量的蛋白分离开,然后将目标蛋白转移到PVDF 膜上,再利用抗原抗体的特异性结合,用特异性的一抗结合目标蛋白,用HRP 标记的二抗结合一抗,再加以ECL 发光液显色,检测目的蛋白在不同处理的样本中表达量的高低变化。

     

     

    服务项目 标本类型 取样要求 保存运输 报告形式 价格(元)
    Western blot 组织 新鲜组织,100mg 及以上 干冰运输 原始胶片,原始扫描图片,整理图片,数
    据分析及报告。
    普通蛋白:120/ 样
    核蛋白:180/ 样
    线粒体蛋白:180/ 样
    膜蛋白:180/ 样
    抗体另算
     Cell 细胞数106以上,细胞沉淀或者加裂解液处理 干冰运输
    蛋白 变性蛋白 干冰运输

     

     

  • 条件性敲除
  • 技术简介

           细胞中有一类基因是维持存活必不可少的,称为必需基因。直接敲除必需基因会导致细胞死亡,因而无法获得目的基因敲除的细胞。条件性敲除为研究这一类基因的功能提供了帮助。

           条件性基因敲除主要通过染色体位点特异性重组酶系统实现,如Cre-loxp,Flp-FRT,Dre-Rox等,其中最常用的是Cre-loxp系统。在待敲除目的基因序列两端各插入一个loxp序列,得到Floxed(flanked  by  loxp)细胞。在细胞未表达CRE重组酶时,该基因是正常表达的。当细胞中转入Cre重组酶后,两个loxp位点之间的序列会发生重组删除,从而实现目的基因的敲除,研究人员可以在基因敲除到细胞死亡这段时间内进行观察和研究。

     

     

     

    应用范围

     

     

    1 2
    适用于致死基因的研究,如当基因敲除导致细胞无法增值,存活等 选择合适的启动子调控Cre重组酶的表达,可以实现特定条件下目的基因的敲除

     

     

    方案选择

     

     

    1 2
    拥有多种荧光筛选标记,结合流式分选,可提高获得阳性目的细胞的概率 在细胞不产生耐药的情况下,可提供多种药筛标签,满足不同实验需求。

     

     

    应用案例

       细胞名称:C3H10T1/2

      基因名称:Ndufa13

       项目方案:构建Cas9/sgRNA和Donor质粒,转染目的细胞,通过流式分选GFP和mCherry阳性细胞,挑选单克隆,经鉴定后进行扩增,得到Ndufa13基因条件性敲除的单克隆细胞株。

     

     

    阳性细胞鉴定:通过对流式分选筛选出的单克隆细胞进行PCR及测序鉴定,Ndufa13基因第3外显子两侧的内含子中各插入一个loxp,获得Ndufa13条件性敲除的单克隆细胞株。

     

    项目流程与周期

     

    交付标准

     

    1 2 3
    按指定方案构建的目的基因编辑细胞株,每个目的细胞株交付基因型正确的2个克隆,每个克隆2支冻存细胞(1*106cells/支) 对应野生型对照细胞 项目报告及质检报告

     

     

企业介绍
上海睿远生物医药科技有限公司

上海睿远生物医药科技有限公司,睿智进取,志存高远。由名校博士,硕士联合创建。是一家致力于为生命科学及医学研究领域提供实验技术服务的新兴cro公司。公司秉承严谨,高效,卓越的理念,为客户提供既快速且稳定的实验结果,在科研需求的基础上实现优势互补,资源共享。 我们致力于生命科学领域的试剂和技术服务,试剂包括:小包装特价抗体,心血管研究专用抗体,优势细胞培养用血清,培养基,复杂难找的生物试剂等。技术服务包括:动物实验病理,及相关分子(PCR)蛋白(WB),细胞实验等基础实验。

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