• 简介

   凝胶过滤层析（又称分子筛），起原理是小分子可以通过多孔凝胶内的孔，而大分子则不能通过凝胶内的孔，又因为其通过凝胶孔内的时间因分子量大小、分子几何形状不同而不同，从而不同分子量、不同结构的样品得到分离。Crystaldex G25 DNA Grade是利用凝胶过滤法去除DNA（>10碱基）中的小分子，提高DNA的纯度。

二、技术参数：

测试坏境：柱内径5cm，高度10cm

三、应用的注意事项：

1. 色谱柱填装

1. 柱子装填前应在柱子下端加入小量的缓冲溶液，排出柱子内部的气泡，关闭柱子出口，在柱内保留少量的缓冲溶液。可以在里面加少许吐温避免气泡产生，也可以换成纯水装柱子。在装柱之前可用抽滤漏斗将胶用缓冲液或者纯净水抽洗3—5倍胶体积。
2. 填料溶胀可在室温下（或者90℃水浴锅中溶胀），加入适量体积的纯化水或者缓冲溶液，溶胀好后将填料倒入层析柱中，必要时可用玻璃棒紧靠柱子内壁引流，以减少气泡的产生，可让填料自然沉降（由于填料比较软不建议压柱）。注意在层析过程中的层析的最大流速要不应大于装柱时的流速。

2. 上样

   最优化的上样比例为0.5-1%，根据样品实际情况也可增加上样比例。如用于脱盐或者缓冲液交换，可以按照柱体积的25—30%上样。如果样品浓度过低，则需要先浓缩后再上样，这样可以得到更好的分离效果。上样前样品需要先用0.45或者0.22的微孔滤膜过滤，去掉颗粒物。上样的过程中尽量避免气泡，否则会影响层析效果。

3. 层析流速

    G25葡聚糖类凝胶可以有比较高的流速。

4. 再生、清洗

   层析柱用完后用 0.2M NaOH 或者非离子型去污剂清洗层析柱60-120分钟，再用纯水和20%各冲洗3个柱床体积后保存。保存

  在 20%乙醇中，4℃长期保存。