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游离DNA提取试剂盒
  • DK607-01
  • 莱枫
  • 上海市
  • 现货
  • 50次盒
  • 4200
  • 2022-07-28 10:47:42

上海雪舞生物科技有限公司

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游离DNA(或称循环DNA,以下简称cfDNA)是一种无细胞状态的、片段化的胞外DNA,存在于血液、滑膜液和脑脊液等体液中,主要以为核小体的形式存在,片段长度主要为178 bp及其倍数。cfDNA在正常人的血液中含量甚微,平均值为13 ng/ml,而当机体在一些特殊状态时(如患有肿瘤、自身免疫性疾病、感染性疾病、中风、心肌梗死及妊娠等),其含量明显上升,比如恶性肿瘤患者平均值达到180ng/ml。
适合处理的样品为血清、EDTA-K2、EDTA-K3或ACD抗凝的血浆,不适合处理肝素抗凝的血浆。
提供负压抽滤和离心过滤两种方式回收DNA:
DK607-01 (50次):负压抽滤,最大处理体积为4 ml,轻松获得≥30 ng cfDNA。。
DK607-S-50 (50次):离心过滤,每次处理200 μl样品,以孕妇血浆为例,可获得0.8-3.2 ng cfDNA。
Buffer CFDA可作为样品保存液,方便分次采样和样品的异地运输;
Buffer CFDA含DNA吸附基质,能有效去除细胞DNA;
无需添加Carrier RNA,回收率约70-80%(见实验示例);
DNA吸附柱-L6,可连接30 ml-扩容管,负压抽滤快速完成DNA结合和洗涤步骤,在台式离心机上完成洗脱步骤,最小洗脱体积为25 μl。
DNA吸附柱-CS,最小洗脱体积为10 μl。
cfDNA含量甚微,浓度低于Nanodrop等微量分光光度计和常规琼脂糖凝胶电泳检测下限,建议使用Qubit荧光计测定总DNA浓度,使用Agilent Bioanalyzer 2100电泳并测定区域DNA浓度。如存在大量细胞DNA,前者明显高于后者,两者的比例可作为判断能否进行后续实验的依据之一。
改进琼脂糖凝胶电泳方法可观察178 bp核小体单位DNA,同时能判断是否有细胞核染色体DNA残留。电泳详细方法:琼脂糖凝胶电泳鉴定游离DNA

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